合成含修饰核苷酸的转录本中文操作指导
转录是从DNA序列合成RNA的过程，是大多数细胞中必不可少的生命过程。体外转录在生物研究中（从基因表达研究到RNA病毒疫苗开发）是一种颇具价值的技术手段。
1.修饰核苷酸在疫苗/药物中的应用
在RNA疫苗和RNA药物的开发和生产过程中，有时会出现RNA转录产物的免疫原性问题。在将RNA导入宿主后，会引起免疫应答从而导致RNA发生降解，进而使疫苗或治疗药物无效。在很多情况下，在转录过程中使用修饰核苷酸（rNTP）可减轻这一问题的影响。
修饰的核苷酸是典型核苷酸的衍生物。修饰的核苷酸掺入RNA后会改变宿主“看待” RNA转录产物的方式，从而降低宿主免疫细胞和核酸酶检测到其存在的能力。目前，修饰核苷酸已应用于疫苗研发中，尤其是针对癌症和RNA病毒（例如，寨卡病毒）的疫苗。在疫苗开发和生产中，三种最常用的修饰核苷酸分别为伪尿苷-5'-三磷酸（伪UTP，Ψ）、1-甲基伪尿苷-5'-三磷酸（m1Ψ）和5'-甲基胞苷（m5C）。
在转录过程中，RNA聚合酶读取DNA序列并产生互补的反平行RNA链。该RNA链为初级转录产物，通常被称作RNA转录产物。体外转录是在细胞外受控环境中产生RNA较为便捷的方法。
体外转录在选择DNA模板时灵活性较高，对模的要求也较少。模板必须经过纯化且须为线性，还应该具有双链启动子区域。质粒或克隆载体、PCR产物、合成的oligos（寡核苷酸）和cDNA（互补DNA）都是可接受的模板类型。
2.选择体外转录系统
Promega 的RiboMAX™ 体外转录系统可生成的高质量RNA转录本可直接用于体外或体内翻译。您可以修饰DNA序列，将DNA快速地转录为RNA，再通过RNA的翻译确定DNA修饰所造成的影响。同样，编码目标蛋白的DNA序列也可被快速转录为mRNA，然后包装进选定的表达系统中，用于治疗或疫苗接种研究。也可与经过修饰的核苷酸和cap类似物兼容，并可用于生产经过标记的RNA探针。
作为40年体外转录试剂的领先供应商，为了更好地服务和支持客户在快速发展的mRNA治疗药物开发领域的需求，我们已升级了值得信赖的原料试剂的生产和质量属性，以确保其符合mRNA治疗药物生产的严格质量要求。
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3.合成含修饰核苷酸的转录本操作指导合成含修饰核苷酸的转录本操作指导
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关于Promega公司
普洛麦格公司（Promega Corporation）是为生命科学行业提供创新解决方案和技术支持的领先者。公司拥有超过4,000种产品的产品组合，服务于细胞生物学、DNA、RNA及蛋白质分析、药物研发、人类身份鉴定、分子诊断等生命科学领域。过去45年间，这些工具与技术的应用范围持续扩展，目前被全球科研机构、法医部门、制药企业、临床诊断实验室，以及兽医、农业和环境检测领域的专业人员使用。普洛麦格总部位于美国威斯康星州麦迪逊市，在16个国家设有分支机构，并通过50余家全球经销商提供服务。如需获取更多信息，请访问www.promega.com。
