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发布日期:2025/8/21 16:22:00

解放双手的秘密

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常规纯化
 
01
初步纯化:捕获目的蛋白/抗体,减少样品中大部分杂质及对目的蛋白/抗体有影响的物质;选择通量大、载量大的纯化方式。
02
中步纯化:浓缩和纯化样品,进一步去除杂质;选择通量高、分辨率高的纯化方式。
03
精细纯化:进一步去除较难去除的少量杂质,使目的蛋白/抗体纯度提高;选择回收率高、分辨率高的纯化方式。

 

 

 

 
 
 
 
 
举个例子吧
 

标签融合蛋白纯化:

常首选亲和层析,如Ni-NTA 、Ni-IDA 、Ni-TED 、GST预装柱;其次选择离子交换层析;提高纯度可进一步选择凝胶过滤层析。

 

无标签蛋白纯化:
常根据pI选离子交换层析,如SP柱、Q柱、CM柱、DEAE柱,或根据特异性吸附力选择亲和层析,或根据分子量差异选择凝胶过滤层析。

 

抗体纯化:
一般首先进行离子交换层析,进一步盐析,凝胶过滤层析,最后进行亲和层析,如Protein A柱、Protein G柱、Protein A/G柱。

 

 
 
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亲和纯化

离子交换

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