对于DNA来讲，多种维度都可以作为Oligo的量的描述。具体有：

       目前最主流的定量方法，就是使用NanoDrop等微量核酸定量仪，或者分光光度计，通过检测DNA的260nm处的吸光值，换算为ng/μl的数值。（另外一种是根据核酸染料的荧光值来定浓度，不在本文的讨论范围内。）

       所以通过仪器检测，我们会得到两个对于定量来讲最重要的数值，分别是A260（260 nm处的吸光值），和质量浓度ng/μl值。对于不同种类的DNA，这两个数值有的准确，有的不准确。

       DNA的种类，在这边大致分为两种：一种是天然的或人工合成的长的单链/双链DNA，通常不带有修饰，比如提取的基因组DNA，质粒DNA，胶回收产物等；另一种是短的，化学合成的单链DNA，通常被称为Oligo，比如引物、探针等。

       对于上述这两种DNA，其最适合描述它们的量的维度是不同的。

      质量浓度通常适合描述第一种长链DNA，因为其序列比较长，ATCG占比比较平均，260 nm吸收光的能力被平均化了，对于单链DNA，大致为1 OD对应33 ug，而对于双链DNA，大致为1 OD对应50 ug。比如质粒，当我们用NanoDrop检测一管质粒的浓度时，仪器会直接给出数值，比如100 ng/μl。

      这个值是如何得来的呢？是仪器计算出溶液的OD值（即A260吸光值），然后通过“1 OD对应50 ug”这个参数，将其换算成了ng/μl的数值。

      但是如果检测的是短的单链DNA，这个ng/μl就不那么准确了，需要使用A260吸光值来换算其真正的质量。

       对于短的核酸如oligo来说，每个碱基的吸光性质对整条序列的影响都非常大，并且ACTG四种核苷酸的吸收光谱能力是不同的，最大的吸收值也在255~280nm范围内，不是准确的260nm处。所以对于Oligo来讲，A260吸光值与序列核苷酸种类的组成以及上面的修饰（尤其是荧光类的）密切相关，吸光值与质量的关系已经不是1 OD对应33 ug了。

       比如对于序列A18(AAAAAAAAAAAAAAAAAA)，如果按照常规的定量，A260=1时，其体现出的质量浓度为33ng/μl。而实际上，A260=1时的准确质量浓度为25.41 ng/μl。

       因此，对于Oligo的定量，不能直接使用仪器给出的ng/μl数值，为了保证得到准确的定量结果，需要根据oligo来进行摩尔消光系数的定制化设置，通过A260的数值，进行摩尔浓度的换算。

      使用的换算方法，称为朗伯比尔定律(Lambert-Beer law)，公式非常简单：

Oligo溶液浓度（μM）= A/E*1000000

       其中A是oligo溶液在260nm处的吸光值，E是oligo的摩尔消光系数。

       摩尔消光系数(ε260)是指1摩尔寡核苷酸链水溶液在260 nm处的吸光值。该数值决定了寡核苷酸链质量与合成OD数的关系。组成碱基种类随机且平均的情况下，可以近似认为DNA双链1 OD的量为50 μg，单链寡核苷酸1 OD的量为33 μg。但对于客户定制的寡核苷酸链，需要根据序列进行计算。

      举个例子：对于序列TTTTTTTTTTTTTTTCAAGGCACGTCCCAGACGCATCAA（摩尔消光系数E=355900 L/(mole·cm)）的一管溶液，如果我们测得该溶液A=0.5，那么Oligo浓度（μM）= 0.5/355900*1000000=1.4，即溶液浓度为1.4μM。

      也就是说，朗伯比尔定律将OD和摩尔数准确的关联到一起了。其关联关系是

nmole = OD / E * 1000000

      还是举上面的例子，对于序列TTTTTTTTTTTTTTTCAAGGCACGTCCCAGACGCATCAA（摩尔消光系数E=355900 L/(mole·cm)），如果我想合成100nmole，那么

100 = OD / 355900 * 1000000

       很多人会使用微量核酸定量仪（如NanoDrop仪器）判断一个产品管中的定量是否准确，方法非常简单，可以用下面这个公式进行快速计算：

理论A260 = 该管中的OD数 * 1000 / 加水体积(μl)

       例如，一管5 OD的Oligo，使用500 μl水溶解，那么使用NanoDrop测定其A260数值，应该等于5*1000/500 = 10。如果测得A260超过10，说明实际含量偏高，如果低于10，说明Oligo供应商给的量不足。相应的误差也能够轻松计算出来。

       注意，切不可根据通用的参数进行ng/μl或mole数的换算，如果需要换算，请参考5中的公式。

      可以发现，国内Oligo供应商通常都默认用OD作为订单的合成量维度，而不是nmole。这是因为使用OD来下单，对于生产和检测都比较方便，它体现的就是A260吸光值，可以直接通过仪器检测的A260来确定分装的体积。客户拿到溶液之后，也比较容易通过核酸定量仪来确定产品的量是否足够，比如，如果客户订购15 OD/管的oligo，使用1 ml水溶解之后，其A260吸光值就是15；1 OD/管的oligo，使用1 ml水溶解之后，其A260吸光值就是1，非常好检测。

       但这样会有一个弊端，就是无法直接体现订单的nmole数，必须通过合成报告单中的结果去进行查询，比如下图中的案例：

       其实，国外很多公司都是可以直接用nmole作为合成量的，生工也在合成单中提供了以nmole量为维度的选择。