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发布日期:2024/1/25 10:27:00

糖基化的变化会影响治疗蛋白的疗效和安全性,影响其生物活性、血清半衰期和免疫原性。对单糖以及唾液酸组成分析可以检测糖基化的变化,并可应用于工艺开发和制造程序的质量控制。因此,我们需要对蛋白质进行常规分析,以确定其单糖和唾液酸的数量和特性。

 

一、抗体去糖基化

 

利用IgG特异性内源性糖苷酶去除天然抗体上的Fc糖型,包括高甘露糖、杂合型、复杂型和平分型糖。

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GlycINATOR 

 

GlycINATOR (EndoS2)是一种IgG特异性内糖苷酶,可水解Fc糖基化位点上的所有糖苷形式。该酶作用于天然IgG,能够快速分析岩藻糖基化。

 

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 IgGZERO 

 

IgGZERO (EndoS)是一种在Fc糖基化位点水解复杂N聚糖的IgG特异性内糖苷酶。该酶在核心GlcNAc外去糖基化IgG,它对高甘露糖和杂交型聚糖活性有限,但可以去除IgG上的双三元聚糖

二、聚糖图谱

 

利用一系列糖类特异性蛋白酶、内切和外切糖苷酶促进N-和O-糖基化蛋白质的分析。

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PNGaseF

 
 

PNGase F(肽N-糖苷酶F)是一种糖酰胺酶,水解所有哺乳动物天冬酰胺连接复合物、杂化或高甘露糖寡糖的多肽天冬酰胺和最内层GlcNAc之间的酰胺键。该酶被广泛用于MS分析之前的样品制备-以减少蛋白质的异质性,并可以用于释放聚糖的分析以及研究N-聚糖的功能作用。

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OpeRATOR®

 

OpeRATOR是一种O-聚糖特异性蛋白酶,可消化携带粘蛋白型O-聚糖的蛋白质糖基化丝氨酸和苏氨酸残基的N端。产物为携带O-聚糖的糖肽,该酶可以进行O-聚糖分析、O-糖肽定位和位点占用确定,以及应用于MS中等水平分析的方法。

来源于优宁维药物研发官网

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