表观遗传机制越来越多地与广泛的病理学相关,从癌症到代谢疾病,甚至精神疾病。
在酶测定方面,特异性很重要。凭借许多靶向组蛋白H3修饰的表观遗传酶,HTRF优化了全系列高度特异性的检测,每种检测方法都能检测到一个独特的标记。在创纪录的时间内设置您自己的检测。甲基转移酶、去甲基化酶和脱乙酰酶已得到广泛验证。
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通用甲基转移酶检测试剂盒Universal Methyltransferase Assay Kit
当涉及不同的底物或者没有可用的特定探针时,可以通过EPIgeneous甲基转移酶测定,以量化酶甲基化的副产物SAH。这种独特的形式使您能够研究所有类型的甲基转移酶/底物:组蛋白、DNA、蛋白质、小代谢物等。
一种通用生化HTRF®测定,用于快速测量产生甲基转移酶的所有酶的活性S-腺苷同型半胱氨酸(SAH),包括组蛋白(HMTs)和DNA(DNMTs)甲基转移酶家族。这个竞争免疫测定法可直接检测样品中的SAH水平。

图1:HTRF检测SAH基本原理
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EPIgeneous® cellular assays
均相、高灵敏度,基于细胞的检测,用于测量总组蛋白H3蛋白或标记特异性表观遗传组蛋白H3修饰。贴壁细胞和悬浮细胞兼容。
组蛋白H3上赖氨酸的三甲基化使用两种不同的特异性抗体进行检测,一种标记为Eu(供体),另一种标记为d2(受体)。当染料接近时,用光源(激光或闪光灯)激发供体,触发荧光共振能量转移(FRET),在波长(665 nm)发出荧光。一种试剂与组蛋白H3结合,另一种试剂与H3K27Me3结合,从而产生FRET。特异性信号与赖氨酸的三甲基化成正比。

图3:细胞水平检测原理示意图
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Epigenetic Binding Domain assays
三种检测试剂盒(A、B和C)已经验证并对28个关键结合结构域进行了完全优化。对于未经验证的可选择Discovery Kit,可以快速选出A、B或C最适用的试剂盒。所有试剂盒都基于GST标记的结合域/生物素偶联组蛋白肽。
如下图所示,使用抗GST抗体识别结合区域和含有目标链霉亲和素赖氨酸的生物素化肽之间的相互作用,该亲和素通过生物素部分(受体)与肽底物具有高亲和力的相互作用。当染料接近时,用光源(激光或闪光灯)激发供体,触发荧光共振能量转移(FRET),进而在特定波长(665nm)发出荧光。特异性信号与蛋白质/肽相互作用的正向调节成正比。
来源于优宁维药物研发官网