Dupilumab（IL-4Rα全人源单克隆抗体）在2017年上市以来，销量逐年攀升，2022年销售额达到83亿美元，2023年预测将突破100亿。目前Dupilumab获批的适应症已包括：特应性皮炎（AD）、哮喘、伴鼻息肉的慢性鼻窦炎、嗜酸性食管炎、结节性痒疹和慢阻肺（COPD），且其作为首个证明对COPD有临床获益的生物制剂。由于Dupilumab上市后的 出色表现，布局IL-4Rα这一靶点的药企也逐渐增多，目前IL-4Rα已然成为了自免领域的热门靶点，尤其是在特应性皮炎和哮喘领域。
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IL-4Rα信号通路
图一[1]
IL-4可以通过两种不同的受体复合物启动信号转导，一种是在造血细胞上表达的I型受体，另一种是在非造血细胞上表达的II型受体。IL-4与I型受体结合可激活JAK1和JAK3，与II型受体结合可激活JAK1和TYK2，但最终均以磷酸化STAT6介导靶基因的转录与表达参与疾病发生和发展。
II型受体由IL-4Rα和IL-13Rα1亚基组成，可被IL-4或IL-13激活。当IL-4和IL-4Rα结合后再与IL-13Rα1结合形成三元复合物，才具备功能性；或IL-13和IL-13Rα结合后再与IL-4Rα结合形成三元复合物，参与下游信号转导。因此阻断IL-4Rα可同时阻断两个2型免疫反应的强效调节因子——IL-4和IL-13，通过I型受体和II型受体发挥作用，阻断Th2炎症的中枢通路，实现"双靶点"的作用机制。
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靶向IL-4Rα的在研药物
图二[2]
目前，国内针对IL-4Rα这一靶点布局的药企也比较多，研发方向主要集中在自免/过敏性疾病领域，上表列出的是目前已进入II期临床以上的靶向IL-4Rα药物。进展最快的是处于临床III期的康乃德的CBP-201和康诺亚的CM310，康乃德的CBP-201于2022年10月获得了关键性临床数据，CM310目前主要由石药集团推动临床试验，在COPD领域，国内只有CM310在临床试验中。此外康方生物、三生国健、恒瑞医药、正大天晴等药企在IL-4Rα靶点上也均有布局。在国外市场，辉瑞还布局了一款IL-4Rα/IL-13R/TSLP三抗，目前处于临床I期，治疗特应性皮炎。另外目前也有一些公司处于早筛阶段。
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新品介绍
品名：IL-4/IL-4Rα Binding Assay Kit
产品货号：500 tests (63ADK000CB50PEG); 10000 tests (63ADK000CB50PEH)
HTRF IL-4/IL-4Rα结合试验旨在测量IL-4和IL-4Rα蛋白之间的相互作用。利用HTRF(均相时间分辨荧光)技术，该检测能够以高通量形式简单快速地表征化合物和抗体抑制剂。HTRF作为一种均相技术，相比于ELISA和Western Blot方法步骤更少，操作更简单，也更节省实验时间，适配全自动工作站。同时，可以保证较宽的线性动力学范围和较高的灵敏度。
实验原理：如图三所示，采用Europium标记的抗Tag-1 (HTRF供体)和d2标记的抗Tag-2 (HTRF受体)检测IL-4与IL-4Ra的相互作用。当供体抗体和受体抗体由于IL-4和IL-4Ra的结合而接近时，供体抗体的激发触发了向受体抗体的荧光共振能量转移(FRET)，而受体抗体在665 nm处特异性发射。这种特异性信号与IL -4/IL-4Rα相互作用的程度成正比。因此，阻断IL-4/IL-4Rα相互作用的化合物或抗体会导致HTRF信号的减少。
图三
操作步骤：如图四所示，使用此试剂盒可在1.5-2h内获得实验结果。在使用20μL体系情况下，在检测板中分别加入2μL抑制剂，4μL IL-4蛋白和4μL IL-4Rα蛋白，室温孵育15min，再加入HTRF供体和受体偶联的抗体各5μL或HTRF供体和受体偶联的抗体混合物10μL，室温下孵育1h 即可读板。另外，您可以根据您的实验体系等比例扩大或缩小加样体积。
图四
模型验证数据：如图五展示了使用上市药物IL-4Rα单抗Dupilumab进行模型验证的数据。
图五
来源于优宁维药物研发官网
