TrypLE™ Select是一种利用微生物生产的动物胰蛋白酶替代物,是一种无动物来源的重组酶,可用于解离一系列的贴壁哺乳动物细胞,包括VERO、HEK 293、A529、MRC-5、CEF、CHO、原生人角质细胞以及胚胎干细胞,它采用完全不含动物源性和人源性成分的可控式发酵工艺生产。通过该工艺可以生产出纯度极高且对细胞作用温和的试剂。
特点
➤ 高度纯化的非动物源性细胞消化酶;可代替猪胰蛋白酶
➤ 室温稳定——更易于保存和使用;节省了宝贵的冰箱保存空间
➤ 对细胞作用温和——无需胰蛋白酶抑制剂
➤ 适用于有血清和无血清条件(部分细胞系无血清工业化生产)
➤ 直接替代胰蛋白酶,无需改变实验方案
➤ 经济——在研究应用中较标准的胰蛋白酶更经济高效
目前在国内我们已经证实了TrypLE胰酶成功用于疫苗中各种细胞消化传代如VERO细胞、二倍体细胞、CEF细胞、293细胞、以及干细胞等,并在部分细胞系中实现了无血清传代。
Case # 1
TrypLE 胰酶在各种细胞解离上的应用。

Case # 2
TrypLE 重组酶在脐带间充质干细胞解离上的应用。

Pn 代

Pn+1代

经验证TrypLE 重组酶在间充质干细胞上应用效果良好。
Case # 3
TrypLE 重组酶在MRC-5细胞解离上与Trypsin胰酶对比应用。
消化前:

消化后:

经验证TrypLE select 胰酶在MRC-5细胞消化上与Trypsin猪源胰酶没有明显区别。
Case # 4
TrypLE 胰酶在VERO细胞球状微载体培养上的成功应用。

Gibco TrypLE 胰酶与Trypsin胰酶没有任何明显区别,并且TrypLE 的优势在于消化完成超过10分钟后再添加血清终止,Vero细胞没有受到任何影响,并且细胞活力较高。
Case # 5
TrypLE 胰酶在VERO细胞无血清培养及片状微载体上的应用。
培养基:Gibco VP-SFM/OptiPRO SFM
胰酶:TrypLE Select

Gibco VP-SFM /OptiPRO SFM 两款培养基搭配Gibco 重组胰酶TrypLE Select 成功实现了VERO细胞在细胞工厂上无血清传代,并实现了由细胞工厂到片状微载体细胞无血清培养的过度。
Case # 6
TrypLE胰酶在CEF 鸡胚成纤维细胞上的应用。

TrypLE胰酶消化CEF细胞后无血清终止和血清终止,最终1#搭配Gibco二倍体产毒培养基,2#搭配MEM培养基条件下,产毒滴度表现相当。表明Gibco 能够实现CEF细胞无血清传代培养及产毒。
结论
通过以上6个案例表明,Gibco TrypLE Select 重组胰酶可以成功替代Trypsin 胰酶进行细胞消化,在VERO 细胞和CEF细胞上同时可进行无需添加血清终止消化传代。Gibco TrypLE Select 重组胰酶成功实现了VERO细胞在细胞工厂上无血清传代,并实现了由细胞工厂到片状微载体细胞无血清培养的过度。由此避免了猪源胰酶消化血清终止带来的产品出口阿拉伯国家的问题,同时降低了引入外源因子的风险,提高产品的安全性。因此重组胰酶的使用将是今后的主流趋势。
来源于优宁维药物研发官网