什么是BiFC?
想象一下,当两个蛋白质相遇时,荧光如魔法般点亮!BiFC(双分子荧光互补)技术正是这样的神奇工具:将荧光蛋白(如YFP、Venus)切成两半,分别与目标蛋白融合。当目标蛋白相互作用时,荧光片段重新组装发光,让你在活细胞中直接「看见」互作发生的时间、位置和强度!
01服务简介
双分子荧光互补(BiFC)技术源于2002年Hu等人的创新研究,通过将荧光蛋白(GFP/YFP等)拆分为无荧光活性的N端与C端的两个片段,分别与待验证的两个蛋白融合表达。当蛋白互作发生时,荧光蛋白片段N端与C端也会重新重组形成完整的有活性的荧光蛋白,在活细胞内实时发出可检测的荧光信号,实现蛋白质相互作用的动态定位与定量分析。反之,若两个蛋白之间没有相互作用,则不能被激发出荧光。生工生物双分子荧光互补(BiFC)技术能够提供在动物/植物中蛋白质与蛋白质相互作用研究服务,助力蛋白质在体内是否存在相互作用和细胞内蛋白相互作用的位置等调控机制的深入探究。
02主要应用
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细胞内蛋白相互作用的实时检测:在活细胞或组织中直接观察蛋白质的相互作用,确定蛋白互作发生的具体亚细胞区域;
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蛋白质复合体的组装与动态研究:信号通路关键节点鉴定与疾病相关蛋白互作分析;
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植物与微生物学研究:植物生理与抗逆机制与微生物致病机制。
03服务信息
项目名称 | 样本类型 | 周期(工作日) |
动物双分子荧光互补(BiFC)服务 |
构建好的质粒/菌液
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20~30 |
植物双分子荧光互补(BiFC)服务 |
注:
(1)动物双分子荧光互补BiFC服务,默认转染至293T细胞中进行验证,如需在其他细胞中验证,请咨询技术支持;
(2)植物双分子荧光互补BiFC服务,默认在本氏烟草中进行验证。
04服务流程
动物双分子荧光互补BiFC:
接受订单及样品——实验设计(确认目的蛋白接在荧光蛋白的N端还是C端)——基因合成载体构建——质粒转染至细胞(默认293T细胞)——荧光检测——分析——交付
植物双分子荧光互补BiFC:
接受订单及样品——实验设计(确认目的蛋白接在荧光蛋白的N端还是C端)——基因合成载体构建——质粒转化农杆菌——农杆菌注射烟草叶片(默认本氏烟草)——共聚焦显微镜观察与拍照——分析——交付
05交付内容
动物双分子荧光互补(BiFC)服务交付内容
1) 构建完成的剩余质粒;
2) 重组载体质粒图谱、序列信息和测序结果;
3) 默认做1个阳性对照,3个阴性对照,1个实验组,共5组实验;
4) 阴、阳对照各拍1个视野,2个单分子阴性对照和1个实验组各拍5个视野,每个视野含YFP、DAPI、Merge共3张图;
5) 报告以及全部原始数据。
植物双分子荧光互补(BiFC)服务交付内容
1) 构建完成的剩余质粒;
2) 重组载体质粒图谱、序列信息和测序结果;
3) 默认做1个阳性对照,3个阴性对照,1个实验组,共5组实验;
4) 阴、阳对照各拍1个视野,2个单分子阴性对照和1个实验组各拍5个视野,视野含YFP、Bright field、Merge共3张图;
5) 报告以及全部原始数据。
06部分结果展示
植物双分子荧光互补(BiFC)图
以上数据均来自生工生物
植物双分子荧光互补(BiFC)图
以上数据均来自生工生物
如果您对此项目感兴趣或者想了解更多内容,可以联系我们当地办事处的销售,也可以联系我们技术支持沟通项目细节。期待与您在这个夏天的“相遇”!
技术支持
双分子荧光互补(BiFC)服务
电话:021-3777 2245
邮箱:service5@sangon.com