生物发光检测更适合需要高灵敏度与低背景干扰的场景。由于信号由内部产生且无需外部照明，生物发光在活细胞检测和动态分析中表现卓越，尤其适用于低丰度靶标研究。

常见应用包括基因表达监测、蛋白质互作分析及时程性信号事件追踪。相较于荧光，生物发光的光毒性更低，更适合长时间活细胞实验。延伸应用可参考：发光检测资源中心。

活细胞成像技术使研究者能实时观测生物过程，而非依赖固定样本或终点检测。该技术可在保持细胞天然状态的同时获取基因表达、蛋白定位及细胞信号传导等动态事件数据。当与发光或荧光报告系统结合时，活细胞成像兼具空间与时间分辨率，可同时监测跨时间维度和不同细胞区室的变化。

生物发光成像的关键优势在于其信号具有固有稳定性和持续性——无需像荧光标记那样依赖外部激发。这不仅可直接可视化活细胞内的蛋白动态，避免了反复样本激发的需求。外部激发的缺失也降低了光毒性和光漂白风险——这些常见问题会随时间推移损害细胞活力和信号完整性。

活细胞成像为实时监测生物事件提供了一种高灵敏度、低背景的解决方案，特别适用于需要信号清晰且对细胞干扰最小的应用场景。像GloMax® Galaxy细胞成像仪这类设备——将生物发光、荧光和明场成像整合于单一平台——支持多种活细胞研究。这些在维持生理条件的活细胞系统中的研究包括：可视化蛋白质相互作用、监测蛋白质降解或靶标结合、追踪细胞信号动态等。

上图：使用NanoBRET® Nano-Glo® 检测系统检测蛋白质：小分子相互作用。视频在 GloMax® Galaxy 细胞成像仪上捕获。

4.选择考量

虽然像 GloMax® Galaxy 这样的仪器支持多种检测应用，但选择最佳检测方法需综合考虑信号强度与仪器配置等实际因素。在基于光的检测技术领域，没有绝对完美的解决方案——每种方法都具有独特优势，最终选择取决于您的具体实验需求。

当实验对灵敏度和低背景要求较高时（例如检测活细胞微弱信号或进行长期动态响应监测），生物发光通常是更优选择。由于不存在自发荧光和光漂白问题，使其在低丰度靶标检测和长周期动力学研究中表现尤为突出。

另一方面，在需要多重检测或高空间分辨率的实验中，荧光检测仍是首选技术。诸如流式细胞术和活细胞成像等应用，往往依赖于荧光探针的多功能性和卓越的成像能力。

仪器设备的选择是另一项关键考量因素。虽然前文已对比过荧光检测系统的复杂性和生物发光检测仪对灵敏度的严苛要求，但需要强调的是：平台兼容性、样品通量需求以及实验室现有操作流程，都会对检测方案的最终选择产生重要影响。

为便于直观对比，下表总结了两种检测方法的核心特征：

5.结论