免疫组化/免疫荧光是神经科学研究中常用的实验方法，为了在同一个组织或细胞标记两个目的蛋白/结构，或者是在同一组织中观察不同的细胞型态，很多研究者需要用到双标或者三色标记。在此类实验中，需要尽量使用不同宿主来源的抗体，以便后续连接二抗显色。目前市面上抗体来源宿主多为小鼠或兔，寻找不同来源的抗体便成了实验所需。

为了给您更大的实验设计空间，Alomone Labs特别开发了豚鼠来源的一抗系列。这些抗体在灵敏度与特异性上与兔、鼠抗体表现相当， 让您可轻松组合不同宿主来源的一抗，确保多靶点成像。

在IP（尤其是co-IP）实验中，在使用多种抗体沉淀复合物中的不同蛋白时，通过使用不同宿主来源的抗体，也能够避免交叉反应。例如，同时使用豚鼠抗体和兔抗体分别靶向同一样本中的不同蛋白，每种抗体均与各自的靶蛋白特异性结合，而不会与裂解物中的其他成分发生非特异性结合，可以提高免疫沉淀实验的精确度。

在一项于多发性硬化症（MS）模型[实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）]中探究星形胶质细胞与自身反应性免疫细胞之间相互作用的研究中，研究人员采用一系列免疫检测法研究这些细胞靠近炎性CNS时产生的直接相互作用（1）。研究团队使用Alomone Labs的豚鼠抗连接蛋白-43抗体（#ACC-201-GP）和兔抗P2X 7受体抗体（#APR-004）以及其他来源的小鼠抗CD4，证实了脊髓中星形胶质细胞P2X7受体和连接蛋白43与CD4阳性T细胞的共定位现象。

研究团队成功证明，在EAE大鼠脊髓中，P2X7受体与连接蛋白-43密集共定位，尤其是在CNS-浸润CD4+ T细胞附近（图1）。这种共定位涉及β3-整合素，且依赖于星形胶质细胞的线粒体活性，基于这一发现，有望为调节这些细胞间相互作用的MS治疗药物找到潜在新靶点。

图1：在CNS-浸润CD4+ T细胞附近，P2X7受体与星形胶质细胞连接蛋白-43共定位。（c）P2X7R（品红色）、Cx43（绿色）和CD4+ T 细胞（青色）免疫荧光标记的共焦图像。图中所示感兴趣区域（ROI）用于分析P2X7R和Cx-43信号强度，以及CD4+ T细胞和随机ROI附近的共定位情况。黄线和白色虚线标记出5 μm和20 μm径向距离（从ROI中心开始测量）。比例尺为10 μm。（d）CD4+ T细胞（品红色）和随机ROI（灰色）附近P2X7R信号强度分布图（双因素ANOVA，p=0.039）。（e）CD4+ T细胞（绿色）和随机ROI（灰色）附近Cx-43信号强度分布图（双因素ANOVA，p=0.089）。

在另一项研究中，研究团队将注意力转向TRPV4在线粒体功能中的作用以及该作用与线粒体相关疾病之间的关联（2）。在该研究中，研究人员使用Alomone Labs的豚鼠抗TRPV4抗体（#ACC-034-GP）检测TRPV4与线粒体蛋白MFN1和MFN2的共定位情况。

研究团队进行多色免疫荧光检测，并清晰展示内源性TRPV4如何与内源性线粒体蛋白MFN1和MFN2共定位和相互作用（图2）。其研究结果证明，TRPV4在内质网-线粒体接触点（MAM）与这些蛋白发生相互作用，这种作用对线粒体Ca2+水平和形态学的调控至关重要。

图2：TRPV4与MFN1和MFN2之间的共定位和相互作用。b. 在分离自小鼠骨髓的间充质干细胞中，TRPV4与MFN1或MFN2共定位（白色箭头指示位置）。比例尺：1 μm。d. 在使用小鼠脑纯化获得的线粒体中，TRPV4与MFN1或MFN2共定位（白色箭头指示位置）。在部分（但非全部）线粒体中观察到明显共定位。比例尺：1 μm。

该实验揭示了此前从未研究过的重要相互作用，并使我们以全新视角审视TRPV4如何影响线粒体动态变化及相关疾病。豚鼠抗体为研究人员提供了更多选择，赋予实验设计更大的灵活性。 

如果您想同时标记4种及以上靶标，推荐您使用多重荧光免疫组化技术 (Multiplex immunohistochemical，mIHC) ，它可以做到在一个样本中同时检测多达10种荧光染料，且不限制抗体来源。关于mIHC的两大技术——经典的TSA技术和新兴的SignalStar技术，可点击此处翻阅小优之前的文章。

Alomone Labs中国仓库部分畅销现货：

Anti-TRPV1(VR1) Antibody（ACC-030-0.2ml）

Anti-SCN1A (NaV1.1) Antibody（ASC-001-0.2ml）

Anti-NaV1.6(SCN8A) Antibody（ASC-009-0.2ml，ASC-009-50ul）

Anti-NaV1.8 (SCN10A) Antibody（ASC-016-0.2ml）

Anti-Piezo1 (extracellular) Antibody（APC-087-0.2ml）

Anti-CaV1.2 (CACNA1C) Antibody（ACC-003-0.2ml）

1. K. D. Milicevic, D. B. Bataveljic, J. J. Bogdanovic Pristov, P. R. Andjus, L. M. Nikolic, Astroglial Cell-to-Cell Interaction with Autoreactive Immune Cells in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis Involves P2X7 Receptor, β3-Integrin, and Connexin-43. Cells 12, 1786 (2023). DOI: https://doi.org/10.3390/cells12131786.

2. T. K. Acharya, A. Kumar, S. Kumar, C. Goswami, TRPV4 interacts with MFN2 and facilitates endoplasmic reticulum-mitochondrial contact points for Ca2+-buffering. Life Sci 310, 121112 (2022). DOI: https://doi.org/10.1016/j.lfs.2022.121112.

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