一、结合垫
目的与基本特征:侧流免疫试纸条中结合垫的作用是装载结合物颗粒，使其在整个保质期内保持稳定,并在测试时能有效和可重复地释放结合物。
实际操作时，结合物的固定、干燥以及释放都会影响试纸条性能的变异系数(CV)。结合物混合不均匀或释放不良均会对试纸条的灵敏度造成不利影响。
根据反应体系的不同，有些需要快速释放结合物，而有些更适合缓慢释放。但不管是快还是慢，结合物的释放都必须是持续稳定的。
基于所用材料的特性，通常需要预处理结合垫以确保结合物的稳定性和最佳释放条件。结合垫预处理的方法是将其浸入含有蛋白质、表面活性剂和聚合物的水溶液中，随即干燥。这个过程类似前面描述的膜浸渍和干燥，既可通过手工批量处理也可采用连续的流水线处理，而后者生产的产品均一性更好。
将结合物装载到经过预处理的结合垫上是决定试纸条最终性能的关键步骤通常有两种方法。第一种是将已处理过的结合垫浸入结合物颗粒的悬浮液中。第二种是采用非接触式喷点机如微定量喷头BioDot AirJetQuanti3000进行定量喷酒。
对于结合物体系，选择合适的标记物和恰当的固定方法非常重要。常用的标记物包括胶体金及彩色或荧光单分散性乳胶颗粒标记物可以共价或被动偶联,也可以定量读取。
共价偶联对试纸条的定量检测至关重要，因为与被动偶联不同，其配体和颗粒物之间形成的键更稳定。
材料:材料一般选择玻璃纤维，聚酯纤维，或人造丝。
流动特性:为达到最佳效果，材料必须亲水，并且保证液体快速流动。侧流免疫分析试纸条使用的大部分材料本质上是疏水的，所以必须进行预处理，使其具有亲水性。
预处理通常由试纸条生产商完成，而不是材料供应商，但也有例外情况。最具盛名的是 Whatman 公司(Kent，UK)生产的Accuflow系列预处理结合垫预处理的方法是将垫浸入含蛋白质、聚合物和表面活性剂的溶液中，然后如上所述在高温下干燥。
释放特性:在货架期内，结合垫必须高效、可重复地释放结合颗粒。通常，由于结合颗粒物与材料纤维的结合特性，会导致释放发生变化。在进行优化时，研发化学稳定性蔄浜只铫誰茂的材料应最大限度地减少这种变化，使结合颗粒最有效释放显得尤为重要。
稳定性:在整个保质期内(长达两年)，结合垫上的结合颗粒必须保持稳定，而大部分材料中的黏合剂往往会影响其稳定性。因此，优化试纸条时，要考虑不同材料与蛋白-结合物颗粒的相容性问题。
制造商和制备问题:最常见的产品来自Whatman(Kent，UK)、Ahlstrom(Helsinki, Finland)、Pall Gelman (East Hills, NY, USA)和 Millipore (BedfordMA)这几家公司。
在侧流免疫测定中，结合垫变化最容易引起实验误差。材料的变化可导致下列情况:预处理液体和标记结合物不相容、结合物不稳定、结合物释放不良，以及结合物与疏水性纤维的结合。为了使这些影响最小化，优化结合物颗粒时必须特别注意垫的预处理和颗粒的固定。
二、样品垫
目的:侧流免疫试纸条的一个主要优点就是只需一步便可实现各种样品的检测。样品的种类多种多样，如产妇的全血、结核病患者的痰或散装碎牛肉。
样品垫起着承载样品并使其与试纸条其余组分相容的重要作用，并高效释放待测物。
样品的处理包括滤出微粒或血细胞、调节样品pH、主动结合可能干扰检测的样品组分，以及破坏基质组分如黏蛋白等，从而释放待测物。
由于许多现成的材料不均匀并含有不同的黏合剂，因此，如何选择满足上述功能的材料对检测性能具有很大的影响。
样品垫的预处理方法和结合垫一样，通常就是浸渍和干燥。如有必要，预处理方案需谨慎选择，以免引入变化源，包括缓冲液浓度梯度和干燥过程的边缘效应等
材料:样品垫所用的材料取决于应用的需求。这种材料通常是纤维素、玻璃纤维、人造丝和其他过滤介质。
容量:样品垫材料必须用缓冲液和其他成分进行预处理，干燥后再使用。它还必须能以受控的方式容纳滴加到其上的所有样品体积，从而有助于将流体引导到测定材料中，而不会溢出或在表面流动。
强度:样品垫材料应足够坚固，以便在制造过程中处理。重点需要考虑的点是遇湿抗拉强度。
大批量生产时，垫材浸入流体罐中，它必须能承受来自卷轴到卷轴生产系统的张力，而不至断裂。浸渍作为预处理的其中一步，可用含有pH缓冲液、表面活性剂、封闭试剂(如果需要)、添加剂和其他可以提高检测灵敏度的试剂浸泡样品垫。
某些情况下，样品垫和结合垫采用同一体系，但这种情况并不常见。一般情况下，标记结合物和测定缓冲液是不相容的。在一些检测中，样品垫和结合垫采用同一种材料，但分开处理再组装到一起的情况也时有发生，只是不常见。
三、吸水垫
目的:吸水垫是试纸条的驱动部件，目的是推动样液在试纸条上持续流动。应注意避免液体回流，否则会出现假阳性结果。
材料:通常选用高密度纤维素。一般依据吸收能力、成本和厚度来选择吸水垫的材料，同时也要考虑材料在辊槽中的抗拉强度和可用性。吸水垫的材料可选择的品牌很多，比较常见的是Millipore、Whatman、Ahlstrom和Pall Gelman。
