项目背景
《乳腺癌诊疗指南（2022）》指出：CA15-3、癌胚抗原是乳腺癌中应用价值较高的肿瘤标志物，主要用于转移性乳腺癌患者的病程监测。CA15-3和癌胚抗原联合应用可显著提高检测肿瘤复发和转移的敏感性。由于其对局部病变的敏感性低，且在某些良性疾病和其他器官的恶性肿瘤中也可升高，因此不适合用于乳腺癌的筛查和诊断。有研究表明，CA15-3项目可用于辅助II期和III期乳腺癌患者的监控。对患者进行连续检测得到的CA15-3检测值应与其他临床方法联合用于监控乳腺癌。
性能表现
针对糖类抗原15-3(CA15-3)的检测，西宝生物推出4种单克隆抗体及1种抗原。具体性能如下（以下评估仅代表在西宝生物的工艺体系下的验证，建议客户根据自身工艺进行更为详细的验证）
2.1化学发光（AE）平台
组合1（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）标记吖啶酯；
组合2（三试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）标记生物素+糖类抗原CA15-3单克隆抗体抗体（货号：EKY0017P）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
组合3（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记吖啶酯；
线性范围：1 U/mL-300 U/mL；最低检出限：1 U/mL。
2.2化学发光（AP）平台
组合4（三试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）标记生物素+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）；
组合5（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记碱性磷酸酶；
线性范围：1 U/mL-300 U/mL；最低检出限：1 U/mL。
2.3稳定性评估
2.3.1 各组分工作液稳定性
采用磁珠标记物稀释液（货号：DCD0532A）分别将链酶亲和素磁珠、生物素标记CA15-3抗体浓缩液、磁珠包被CA15-3抗体浓缩液、吖啶酯标记CA15-3抗体浓缩液配置成工作液及采用碱性磷酸酶标记物稀释液（货号：DCD0534A）将碱性磷酸酶标记CA15-3抗体浓缩液配置成工作液，分别进行37℃热稳定性实验。如表1所示：
a.链酶亲和素磁珠工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内（不含S0），表明链酶亲和素磁珠工作液热稳定性良好；
b.生物素标记CA15-3抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内（不含S0），表明生物素标记CA15-3抗体工作液热稳定性良好；
c.磁珠包被CA15-3抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%以内（不含S0），表明磁珠包被CA15-3抗体工作液热稳定性良好；
d.吖啶酯标记CA15-3抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±10%左右（不含S0），表明生物素标记CA15-3抗体工作液热稳定性较好；
e.碱性磷酸酶标记CA15-3抗体工作液单独37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±20%以内（不含S0），表明生物素标记CA15-3抗体工作液热稳定性较好。
表1 各组分工作液热稳定性7天数据（37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异）
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序号 |
CA15-3抗原稀释浓度U/mL |
链酶亲和素磁珠工作液 |
生物素标记CA15-3工作液 |
磁珠-包被CA15-3工作液 |
吖啶酯标记CA15-3工作液 |
碱性磷酸酶标记CA15-3工作液 |
|
S0 |
0 |
0.0% |
-1.5% |
1.2% |
-5.6% |
-1.6% |
|
S1 |
3 |
-4.7% |
-1.5% |
0.4% |
-9.6% |
-17.1% |
|
S2 |
10 |
-4.6% |
-0.1% |
-4.8% |
-11.2% |
-15.4% |
|
S3 |
30 |
-4.5% |
0.7% |
-3.2% |
-11.2% |
-16.7% |
|
S4 |
100 |
-2.9% |
2.3% |
-2.5% |
-9.0% |
-16.6% |
|
S5 |
300 |
0.4% |
5.6% |
-2.7% |
-9.5% |
-17.4% |
|
平均变化（不含S0） |
-3.3% |
1.4% |
-2.5% |
-10.1% |
-16.6% |
|
2.3.2 CA15-3抗原稳定性
采用磁珠标记物稀释液（货号：DCD0532A）将CA15-3抗原（货号：EKY0041C）稀释成5个梯度（液体型），进行37℃热稳定性实验。如表2所示；
a）CA15-3抗原稀释梯度（液体型）2-8℃热加速7天与-20℃储存7天发光值平均变化在±5%以内;
b）CA15-3抗原稀释梯度（液体型）37℃热加速7天与-20℃储存7天发光值平均变化在±5%以内;
c）CA15-3抗原稀释梯度（液体型）37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值平均变化在±5%以内;表明CA15-3抗原稀释梯度（液体型）稳定性良好。
表2 CA15-3抗原稀释梯度（液体型）热稳定性7天数据
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序号 |
CA15-3抗原稀释浓度浓度U/mL |
CA15-3 抗原稀释梯度（液体型） |
CA15-3 抗原稀释梯度（液体型） |
CA15-3 抗原稀释梯度（液体型） |
|
2-8℃热加速7天与-20℃储存7天发光值均值差异 |
37℃热加速7天与-20℃储存7天发光值均值差异 |
37℃热加速7天与2℃-8℃储存7天发光值均值差异 |
||
|
S0 |
0 |
2.7% |
-11.0% |
-13.3% |
|
S1 |
3 |
-3.1% |
-3.4% |
-0.3% |
|
S2 |
10 |
1.8% |
3.1% |
1.3% |
|
S3 |
30 |
0.7% |
0.4% |
-0.3% |
|
S4 |
100 |
-1.6% |
-2.4% |
-0.8% |
|
S5 |
300 |
0.9% |
-1.0% |
-1.9% |
|
平均变化（不含S0） |
-0.2% |
-0.7% |
-0.4% |
|
临床相关性
3.1化学发光（AE）平台
西宝CA15-3抗体配对组合1（两试剂模式）的测试临床样本与罗氏CA15-3试剂赋值的临床样本（相关性R²在0.93左右，相关性较好；
西宝CA15-3抗体配对组合2（三试剂模式）的测试临床样本与罗氏 CA15-3试剂赋值的临床样本（相关性R²在0.94左右，相关性较好；
西宝CA15-3抗体配对组合3（两试剂模式）的测试临床样本与罗氏 CA15-3试剂赋值的临床样本（相关性R²在0.93左右，相关性较好；
3.2化学发光（AP）平台
西宝CA15-3抗体配对组合4（三试剂模式）的测试临床样本与罗氏 CA15-3试剂赋值的临床样本相关性R²在0.94左右，相关性较好；
西宝CA15-3抗体配对组合5（两试剂模式）的测试临床样本与罗氏 CA15-3试剂赋值的临床样本（相关性R²在0.91左右，相关性较好。
测试方案
1）若采用吖啶酯体系，建议CA15-3抗体与吖啶酯的标记摩尔比在1:4左右；
2）若采用碱性磷酸酶或辣根过氧化物酶体系，建议优化酶与抗体标记的摩尔比例。
4.1化学发光（AE）平台
4.1.1化学发光（AE）平台抗体配对组合1
待测样本:预稀释样本加样量20ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；
试剂1：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul试剂1混合，37℃孵育9min，清洗；
第二步：加入50ul试剂2混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
4.1.2化学发光（AE）平台抗体配对组合2
待测样本:预稀释样本加样量20ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；
试剂1：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul M试剂+50ul 试剂1混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入50ul试剂2混合，37℃孵育10min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
4.1.3化学发光（AE）平台抗体配对组合3
待测样本:预稀释样本加样量20ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；
试剂1：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）-吖啶酯稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：20ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul试剂1混合，37℃孵育9min，清洗；
第二步：加入50ul试剂2混合，37℃孵育9min，清洗；
第三步：加入预激发液及激发液，进行测试。
测试使用发光仪器:科斯迈SMART 500S。
4.2化学发光（AP）平台
4.2.1抗体配对组合4（三试剂模式）：
待测样本:预稀释样本加样量10ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；
M试剂：链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）稀释物，用量50ul/测试；
试剂1：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）标记-生物素稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul M试剂+50ul试剂1混合，37℃孵育10min；
第二步：加入50ul 试剂2混合，37℃孵育10min，清洗；
第三步：加入底物，进行测试。
4.2.2抗体配对组合5（两试剂模式）：
待测样本:预稀释样本加样量10ul；采用合适的稀释液将样本稀释10倍；
试剂1：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）包被-磁珠稀释物，用量50ul/测试；
试剂2：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记-碱性磷酸酶稀释物，用量50ul/测试；
反应条件：
第一步：10ul预稀释样本（10倍稀释）+50ul试剂1+50ul试剂2混合，37℃孵育10min，清洗；
第二步：加入底物，进行测试。
测试使用发光仪器:迎凯Shine i2900。
产品应用
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产品名称 |
货号 |
推荐配对 |
|
糖类抗原CA15-3单克隆抗体 |
EKY0017I |
组合1（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）标记吖啶酯； 组合2（三试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）标记生物素+糖类抗原CA15-3单克隆抗体抗体（货号：EKY0017P）标记吖啶酯+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）； 组合3（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记吖啶酯； 组合4（三试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017PO）标记生物素+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记碱性磷酸酶+链酶亲和素磁珠（SA）（货号：DEG0814A）； 组合5（两试剂模式）：糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）包被羧基磁珠+糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）标记碱性磷酸酶； |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体 |
EKY0017J |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体 |
EKY0017P |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体 |
EKY0017O |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017I）-羧基磁珠浓缩液 |
DKY1319A |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017J）-吖啶酯浓缩液 |
DKY1319B |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）-羧基磁珠浓缩液 |
DKY1319C |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017O）-生物素浓缩液 |
DKY1319D |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P）-吖啶酯浓缩液 |
DKY1319E |
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糖类抗原CA15-3单克隆抗体（货号：EKY0017P） -碱性磷酸酶浓缩液 |
DKY1319F |
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羧基磁性微球，1.2um |
DEG0800D |
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链霉亲和素磁性微球，1.5um |
DEG0814A-10ml |
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AMPPD 发光底物液（即用型） |
DCD0517B |
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重组碱性磷酸酶（高活性） |
DCE0108L |
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磁珠标记物稀释液（化学发光） |
DCD0532A |
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糖链抗原CA153抗原，校准质控 |
EKY0041C |
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APS-5发光底物液（即用型） |
ECD0532M-100ml |
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CA153碱性磷酸酶（ALP）标记物稀释液（化学发光） |
DCD0534A |
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如果您需要其他产品，请咨询西宝生物400-021-8158！
