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发布日期:2025/8/8 16:40:00

跑电泳是每个学生物的小伙伴必备技能。有时候忙起来,一天能跑 2~3 块胶。虽说这是生物常见 WB 实验的必要步骤,但是它的确有不少坑。

今天小编为大家整理了一些电泳的小细节,希望能帮助大家跑到更好的条带和结果哦!

 

1.

凝胶速度非常慢,甚至不能凝固

 

A. 需要保持室温或者可放置 37°培养箱中进行凝固。温度越低,凝固时间越久。

B. AP(过硫酸铵溶液)是否使用过久,一般不建议长期使用,应定期更换或者每次配胶重新配置。(配制最好先加 TEMED,然后再加 AP,否则提前加 AP 也可以引发聚合反应。)

C. Tris 缓冲液配置时,是否未调 PH 值。

 

2.

电压和电流

 

A. WB 的电压和电流都是根据自己的样本要求「量身定制」 ,但是都遵循电压越大,蛋白质迁移速率越大的原则,浓缩胶一般小于分离胶。

B. 在进行开始电泳时,应注意观察溶液是否有泳动状态,否则应检测电源线是否松动,接头是否松动。

 

相关产品

Cytiva EPS 301 电源是常见通用电源,可以兼容 Cytiva 大部分电泳仪,半干转印/湿转。

 

3.

用什么浓度的胶呢?

 

根据自己研究的不同蛋白,所使用的胶的浓度也是不同的,蛋白分子量越小,所需的分离胶浓度越高,其交联的孔径越小,可分离出更小的蛋白分子。

 

配方不能固定搭配,适合才是最好的选择  

 

 

4.

跑的胶总是歪歪扭扭,条带不整齐?

 

A. 在制胶过程中由于冷热不均匀导致凝胶聚集不均,蛋白质在其中,就会有不同的迁移率,出现此类情况。

B. 采用较厚的凝胶也容易出现此类情况。

C. 电泳过程中温度过高,散热不佳也会导致 「微笑」效应。

 

相关产品

Cytiva 电泳系列(SE250,SE260,MiniVE 电转电泳一体机等),均采用氧化铝陶瓷板进行电泳,其材质散热能力是普通玻璃板的 40 倍,因而能够有效避免条带弯曲等结果。

  • 单元式设计,无琐碎零件

  • 灌胶/跑胶同一模具,操作简单

  • 可兼容预制胶(10 x 10.5 cm / 10 x 10 cm 玻璃板)

  • 该套装置还可兼容 2 套转印模块(选配),可同时支持 4 块凝胶转印

  • 增加胶的分离度: 8x7/8x9.5 cm, 胶的长度更长

  • 减少微笑效应: 氧化铝陶瓷,散热是普通玻璃板 40 倍, 循环水, 散热良好

  • 节省电泳缓冲液-- 300 mL/SE250, 400 mL/SE260

  • 节省时间:不易漏胶

  • 可外接循环水浴,准确控制电泳温度

  • 兼容预制胶

 

5.

电泳跑胶非常慢

 

A. 检查电泳缓冲液是否过期,是否漏加甘氨酸,是否由于长时间使用长菌污染了。

B. 检查电泳槽是否漏液。

C. 凝胶是否放置过久,可尝试使用新配凝胶。

 

 

 

 

如需订购,请联系:

智慧专线:400-810-9118

更多信息,登录 Cytiva 官网。

 

图片来源:创客贴

 

 
 
 
 
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