微卫星不稳定性（MSI）是肿瘤发生发展中的关键分子标志物，与林奇综合征筛查、免疫治疗疗效预测及肿瘤预后评估密切相关。传统PCR-毛细管电泳法主要依赖短单核苷酸重复（SMR）标志物（如BAT-25、BAT-26），但研究表明其灵敏度在非结直肠癌（non-CRC）等肿瘤类别中存在局限性。近年研究发现，长单核苷酸重复（LMR）标志物通过其独特的分子特性，显著提升了MSI检测的准确性，以多重技术优势，正在重塑MSI检测的临床价值。本文基于两篇近期文献（参考文献1和2），系统阐述Promega LMR标志物的4大技术优势。
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1. 更高的灵敏度与特异性，突破传统检测瓶颈
文献1中数据显示LMR检测方案和SMR检测方案（pentaplex）对肿瘤MMR状态的敏感性和特异性无显著差异（敏感性分别为99% vs 97%，特异性均为99%）。对于非结直肠癌，LMR MSI检测系统的敏感性显著优于SMR方案，而检测pMMR非结直肠癌的特异性无显著差异。因此，LMR检测系统的主要性能优势体现在非结直肠癌dMMR检测敏感性的提升。
文献1研究数据显示：
非结直肠癌（non-CRC）：LMR方案对子宫内膜癌（EC）等非结直肠癌的MSI检测敏感性达95.7%，较传统SMR方案（83.9%）提升11.8%。
MSH6缺陷肿瘤：文献中研究显示LMR方案正确识别97%的MSH6缺陷肿瘤（包括结直肠癌、子宫内膜癌等），解决了传统检测对MSH6缺陷敏感性不足的痛点。
02
2. 片段偏移可视化更强，减少判读误差，为变异判读提供了更高置信度，简化了分析流程
相较于SMR标志物，LMR标志物更大的等位基因片段偏移（图4）为变异判读提供了更高置信度：例如，文献1中LMR检测系统中四个LMR标志物的平均片段偏移为14.9 bp（范围0-43 bp），而四个SMR标志物的平均偏移为5.9 bp（范围0-19 bp）（P<0.001）。
图4.使用LMR MSI panel的微卫星不稳定性高/缺陷错配修复肿瘤中标志物的大小变化。显示了所有微卫星不稳定性高/缺陷错配修复肿瘤的每个长单核苷酸重复标志物（平均值用X表示）的大小变化。每个点都是一个值，可以表示多个数据点。
不同癌症类型的片段偏移程度存在差异：胃肠道肿瘤的平均偏移最大（12.2 bp），乳腺（3.9 bp）和前列腺（3.5 bp）肿瘤最小（图5）。
图5.使用LMR MSI分析系统对微卫星不稳定性-高/低错配修复肿瘤的癌症类型的大小偏移。显示了具有五个或更多样品的每个癌症类型的所有长单核苷酸重复标志物的大小偏移（平均值用X表示）。每个点都是一个值，可以表示多个数据点。Sm，small。
片段偏移大小与dMMR肿瘤表型的检测能力呈正相关——较小的片段偏移会增加误判风险，因为肿瘤峰与胚系stutter峰难以区分。
03
3. 与NGS相比具有更高的可行性
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更少的样本样本量：文献2的数据中的数据表明，与NGS检测相比，LMR MSI检测仅需5ng DNA和10%肿瘤细胞含量，特别适用于小活检、细针穿刺标本和术后残留细胞分散的标本（如新辅助治疗后的胰腺癌或直肠癌）。
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快速周转：60分钟完成PCR扩增，兼容主流毛细管电泳平台，适合高通量筛查场景。
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经济性：单次检测成本较NGS方案更低，适合基层医疗机构推广。
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4. 仅需肿瘤样本的MSI检测
Bethesda指南建议MSI检测需同时检测肿瘤和正常组织配对样本，原因在于原始Bethesda panel中的大多数标志物具有多态性，需通过正常样本确定肿瘤样本中的新生等位基因。
LMR方案中的LMR标志物同样具有多态性，而四个SMR标记为类单态性。基于此差异，LMR MSI检测系统采用了两套不同的MSI分类标准。
文献1中的数据显示
对于LMR MSI方案，有无正常配对样本的肿瘤MSI状态判读一致性在CRC中为98%，非CRC中为91%（表6）。Promega SMR方案（含全类单态性SMR标志物）的判读一致性在CRC中为99%，非CRC中为87%。数据显示，即使无正常配对样本，使用LMR和Promega面板进行MSI检测仍具有可行性，但可能导致非CRC样本灵敏度下降。
表6.在有正常样本和无正常样本对照的情况下，使用QMVR方法进行MSI分析。
总结与展望
长单核苷酸重复（LMR）标志物通过其独特的分子设计（长重复序列、短扩增子）和优化的实验流程，在MSI检测中展现出显著的技术优势：
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灵敏度与特异性双提升，尤其适用于非结直肠癌及MSH6缺陷型肿瘤；
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可视化片段偏移大幅降低判读难度；
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多癌种普适性为精准诊疗提供统一工具。
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更高的可行性：成本更低，操作更快，适合基层医疗机构推广。
随着肿瘤分子诊断需求的日益增长，LMR技术有望成为下一代MSI检测的金标准，推动个体化医疗从“经验驱动”迈向“分子精准”。
参考文献
3. LMR MSI Analysis System | Endometrial Cancer Research | Long Mononucleotide Repeats
上海普洛麦格生物产品有限公司的创新突破
上海普洛麦格生物产品有限公司凭借其微卫星不稳定性（MSI）检测试剂盒（荧光PCR-毛细管电泳法），也是全球首款采用长单核苷酸重复位点的8位点试剂，成为医疗器械创新的典范。该产品于2025年1月获得国家药品监督管理局（NMPA）的创新医疗器械认证(国械注准20253400266)，标志着其在技术和临床应用上的显著优势。
Advantages
技术创新与优势
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全球首款采用长单核苷酸重复位点的8位点试剂：它是全球首个采用新型长单核苷酸重复标志物（LMR）来检测微卫星不稳定性的产品，能够提供更清晰准确的分析结果。
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更高的灵敏度：相比传统的五位点检测系统，此产品显示出更高的灵敏度，尤其适合挑战性样本的分析。
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短片段设计：试剂盒中的8个单核苷酸重复标志物扩增均在200个碱基以内，使得高度降解样本的成功率更高。
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高效便捷：只需不到60分钟即可完成PCR扩增流程，且仅需2~5ng的样本量，大大提高了工作效率并减少了样本采集的压力。
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精准诊断：主要用于辅助鉴别结直肠癌中可能存在的林奇综合征，有助于提升患者的生存率，并实现对癌组织样本位点状态的精准判定。
随着国家对创新医疗器械支持力度的不断加大，像上海普洛麦格这样的企业将有更多的机会展示其创新能力，并为医疗健康事业做出更大贡献。通过持续的技术革新和严格的质量控制，我们相信这款MSI检测试剂盒将在未来发挥更大的作用，为更多患者带来希望。
更多产品信息可联系Promega分子诊断团队，索取下方产品介绍手册。
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公司电话丨010-58256268
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公司邮箱丨mdx@promega.com.cn
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