养细胞的人往往谈“污”色变，明明已经小心谨慎，明明已经步步为营，恨不得戴着显微镜操作，发现污染则前功尽弃。除了在操作过程中保证严格无菌以外，做好培养器具的清洁以及预防培养基污染更是至关重要。

如何判断细胞污染？

 1、培养基浑浊，可以初步判断是细菌污染。
 2、培养基不浑浊，有丝状物质可以初步判断是真菌污染。
 3、培养基不浑浊、没有丝状物质，但是细胞状态变差，生长变慢，在显微镜下观察可能会有小黑点，是细胞凋亡坏死，释放出大量碎片，看起来就像黑胶虫，细胞传代以后就出现细胞间黑点，细胞空泡化，很多类似凋亡、坏死的细胞，最终细胞漂浮，完全死亡。

培养环境大扫除

细胞房、培养箱、水盘、水浴锅...除了是细胞生长的温床，同时也是孕育杂菌的温床，因此养细胞之前，我们要对它们进行彻彻底底的大扫除！

Absin为您提供安全、彻底、又高效的除菌全家桶，包含水浴锅抑菌剂（abs9371）、培养箱除菌剂（abs9372）、细胞房除菌剂（abs9373）、水盘抑菌剂（abs9374），由乳链菌肽、纳他霉素、尼泊金酯类、水等组成，无挥发性，分散均匀，热稳定性高。这套试剂能在湿度较大的条件下杀死常见的毛霉、黑霉、青霉、交链孢霉等霉菌孢子，并能抑制大多数的真菌和细菌生长，如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。

除菌案例：

1、抑制枯草芽孢杆菌

加入除菌试剂后，可以显著抑制枯草芽孢杆菌的生长。

2、抑制霉菌

接种 106 cfu/mL的霉菌至霉菌培养基上，待菌长满后，实验组1、2分别喷洒水浴锅抑菌剂（abs9371）、培养箱除菌剂（abs9372）、细胞房除菌剂（abs9373）、水盘抑菌剂（abs9374），实验组3喷洒无菌水。

喷洒试剂前,

喷洒试剂等待24h后

与常见清洁试剂对比：

保卫细胞，消灭支原体

比杂菌污染更棘手的则是支原体污染，它也是是细胞培养领域的一个世界性问题，世界各国细胞系支原体污染的平均比例为30-60%。支原体的直径约为 0.1-0.3μm，这也就意味着它们可以透过常见的滤膜（0.22-0.45μm），因此常规的无菌过滤方法不能将其去除，而常用的抗生素也对支原体无效。

当支原体污染发生后，它们不会使细胞死亡，甚至能与细胞长期共存，也不会使培养基发生浑浊，细胞外观上看起来也不会有明显变化，实际上却埋下了“隐疾”。支原体在潜移默化中悄悄引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长，竞争营养，分泌有害代谢产物，迅速降低培养液中的葡萄糖，形成酸从而改变Ph值；消耗精氨酸、抑制蛋白合成、细胞分裂减慢、停止生长等，最终影响实验结果。

Absin支原体清除试剂&预防试剂

应用案例：

1、清除猪IPEC-J2细胞中的支原体

支原体清除剂（abs9375）处理猪IPEC-J2细胞3天后，采用Hocest33342染色法对处理前后的细胞进行染色。

2、Absin支原体清除试剂与抗生素类清除试剂对比

400bp左右有条带的为支原体污染。下图是被支原体污染后经支原体清除剂（abs9375）（9、10 条带）和抗生素类试剂（11、12）处理后效果的对比。

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