早在BBB生理结构的发现之前，Paul Ehrlich（对，就是"Magic bullet"概念的提出者）和其学生Edwin Goldman通过一系列的动物染料注射实验，观察到外周（或者大脑）注射的染料，不能染色大脑（或者外周器官），暗示着血液和大脑之间存在着屏障^[2,3]。

随后，在电镜技术和辣根过氧化物酶等的帮助下，BBB的核心结构，脑血管内皮细胞（Brain Endothelial Cells，BECs）得以浮出水面。然而，要发挥BBB的功能，BECs还需要和星形胶质细胞、小胶质细胞、周细胞（Pericyte，也很重要）和神经细胞等相互协作。这些细胞联盟行成的动态结构称之为NVUs（Neurovascular unit，名副其实的A tight unit）。

从结构上就可以看出，BBB作为大脑内环境的核心管家，有效阻止有害的化合物、白蛋白和抗体（防止炎症反应）等大分子的进入。同时，BECs具有高效的外排转运体系（例如ABC和SLC家族），进一步限制一些化合物的通透性。BBB的这一特性也成为了CNS疾病药物，尤其是大分子药物（通常仅有0.01-0.1%的通过率）研发难以避免的核心挑战(A formidable challenge)。值得一提的是，BBB的屏障能力会受年龄、疾病等因素影响。这也为某些疗法提供了契机，例如针对两岁以下儿童的诺华AAV9基因疗法。

但与此同时，我们不能被“屏障”二字所误导。通过被动和主动运输的形式，BECs积极、高效地转运着大脑所需的脂类、糖类和氨基酸等大小分子和养分等[下图左]。这时，内皮细胞具有的转胞吞作用（Transcytosis）就派上了用场[下图左A和B] ^[4]。从内吞步骤上看，其包括受体介导的RMT（本篇主角，也是蛋白转运的主要形式，主要由Clathrin蛋白调控内吞）和吸收介导的AMT（Adsorptive-mediated transcytosis，主要由Caveolae参与内吞，也可以用于开发CNS药物递送）。内吞后，转运的蛋白也不是都能顺利地抵达彼岸，还可能逃不过降解和回运的命运[下图右] ^[4]。因此，胞内的亚细胞运输对于RMT效率异常关键。最后，RMT本身也参与了CNS疾病一些重要致病蛋白，如Abeta的转运。且BECs上面也表达一些重要的药物靶点，如胰岛素受体等。这些也为深入的机制研究和新药开发提供了切入点。

为了克服BBB的挑战，现阶段已有多种潜在策略用于CNS的药物递送，例如定向超声、鼻腔注射和纳米材料等，或者直接利用能有效穿透BBB的药物，如已批准的抗抑郁药物开展联合用药开发。然而上述策略的安全性、有效性和与当下主流大分子生物药的兼容性有限。于此同时，RMT作为大脑摄取（特定）必需大分子的首要机制，且考虑到大脑内丰富的血管结构和覆盖度（面积可达15-25m²）。那么，能否像利用高效的泛素-蛋白酶体系统的PROTAC药物一样，借助（Hijack）BECs 的RMT系统来设计能突破BBB的双特异结合药物？答案是肯定的，而这类通过利用抗体或者天然/改造配体来靶向RMT (转运)受体，进而达到大脑实质递送的双特异抗体、融合蛋白或者功能化的纳米载体等，也被称为“特洛伊木马”。该策略能有效提升药物的BBB穿透能力。以主流的转运受体Transferrin Receptor（TfR）为例，同一分子通过结构改造识别TfR，可提升大脑浓度的20-30倍。该策略的出现，也为一些之前受挫的传统大分子药物提供了新的希望[见下表格]^[1] 。

在蛋白改造技术的推动下，目前已有多种形式的双特异大分子药物进入临床或临床前研究[下表格]，其中比较代表的是Denali的TV (Transport vehicle)技术平台，该平台与传统的双特异抗体结构不同，而是针对抗体的Fc段进行突变文库筛选和改造，用于识别潜在的转运受体[下图]（类似的平台公司还有Bicycle Therapeutics和Bioasis Technologies）^[5]。

至此，我们就回到了开篇的新闻。文章介绍了经典的转运受体靶点如TfR，和新兴靶点CD98等的相关研发和临床进展（常见的转运受体靶点，如LRP-1等进展可参考综述^[4]）。而从药物本身来看，除了形式的创新外，其和转运受体的亲和力（根据不同的机制需求不同），表位特异性和结构（单/双价结合）等对其转运效率也非常关键，也是当下研发和应用开发的关注点。此外，新型药物的一些结构，如Fc片段带来的安全性影响也值得深入研究。最后，除特洛伊木马外，AAV为主导的病毒载体也在CNS递送方向得到了迅速的发展，未来可期。