《细胞探险队》旅程更新!继T(Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78)、B(Raji、Daudi、Ramos、DB)淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系(Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1)、NK细胞系(NK-92、NK-92MI、YT)、成纤维细胞系(3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1)、神经肿瘤细胞系培养合集(SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44)的培养合集后,这次探索的是成纤维细胞系!
紧跟《细胞探险队》,开启细胞培养的奇妙之旅:覆盖上百种细胞系,积累干货经验和技巧,让细胞培养不再难!各位童鞋,如果有想要了解的细胞系或者遇到哪些问题,也欢迎留言~
下期旅程:肺癌细胞系培养合集(A549、H460、H146、H838、HCC827)
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MCF7
01
名称
MCF7(人乳腺癌细胞)
02
别称
MCF 7;MCF.7;MCF7;Michigan Cancer Foundation-7
03
简介
该细胞系(MCF-7)源于一名69岁白人女性乳腺癌患者的胸腔积液。其保留了乳腺上皮特性,能形成隆突结构(domes)并通过雌激素受体加工雌二醇。
04
种属
人
05
组织来源
乳腺,乳房
06
生长特性
贴壁细胞
07
细胞形态
上皮细胞样
08
应用
乳腺癌研究、雌激素受体研究、内分泌治疗药物敏感性测试
09
培养条件
(1)完全培养基配方:MEM(含NEAA)(SH30243.01https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SH30243.01&mk_channel=WXktzj)+10 μg/mL Insulin(sc-360248https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=sc-360248&mk_channel=WXktzj) +10% FBS(SV30208.02https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30208.02&mk_channel=WXktzj)+1%双抗(SV30010https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30010&mk_channel=WXktzj)
(2)温度:37°C;
(3)CO2:5%CO2
10
换液频率
2-3次/周
11
传代周期
3-4天
12
传代比例
1:3-1:6
13
冻存液配方
95%完全培养基+5%DMSO(abs9187https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs9187&mk_channel=WXktzj)或商品化细胞冻存液(130-129-552https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=130-129-552&mk_channel=WXktzj)
14
注意事项
(1)MCF-7生长较缓慢,前期呈岛状,后期过度为单层,属正常现象,无需过度干预。如果生长速度极为缓慢,可尝试更换另外批次的血清,或者提升血清浓度到20%,可有助于改善细胞生长。
(2)MCF-7细胞传代后易形成漂浮簇,前两次传代时需转移漂浮细胞簇,使用细口移液管轻柔吹散,后续传代无需此操作。
T-47D
01
名称
T-47D(人乳腺管癌细胞)
02
别称
T-47-D;T47-D;T47D
03
简介
T-47D 细胞系源自一名 54 岁女性乳腺癌(浸润性导管癌)患者的胸腔积液,是一种分化较好的上皮细胞亚株。该细胞具有细胞间连接,表达雌激素受体(ER)、其他类固醇受体、降钙素受体以及 WNT7B 癌基因。
04
种属
人
05
组织来源
乳腺;乳房
06
生长特性
贴壁细胞
07
细胞形态
上皮细胞样
08
应用
激素信号通路、内分泌治疗耐药机制及靶向药物的体外筛选
09
培养条件
(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30096.FShttps://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SH30096.FS&mk_channel=WXktzj)+10 μg/mL Insulin(sc-360248https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=sc-360248&mk_channel=WXktzj) +10%FBS(SV30208.02https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30208.02&mk_channel=WXktzj)+1%双抗(SV30010)
(2)温度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10
换液频率
2-3次/周
11
传代周期
2-3天
12
传代比例
1:3-1:5
13
冻存液配方
95%完全培养基+5%DMSO(abs9187-100mLhttps://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs9187-100mL&mk_channel=WXktzj)或商品化细胞冻存液(130-129-552https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=130-129-552&mk_channel=WXktzj)
14
注意事项
(1)T-47D细胞对于PH值较敏感,在细胞复苏接种前,预平衡培养基15分钟,维持pH 7.0-7.6。培养过程中观察细胞状态,尽量避免细胞培养密度过高。
MDA-MB-231
01
名称
MDA-MB-231(人乳腺癌细胞)
02
别称
MDA-MB 231;MDA.MB.231;
03
简介
DA-MB-231细胞是源自51岁女性乳腺癌转移胸水的三阴性乳腺癌(ER⁻/PR⁻/HER2⁻)黄金标准模型,以高侵袭性、转移潜能及耐药性研究为核心应用。
04
种属
人
05
组织来源
乳腺肿瘤,转移性胸膜渗出液
06
生长特性
贴壁细胞
07
细胞形态
上皮细胞样
08
应用
转移机制探索、化疗/靶向药物耐药性研究及肿瘤微环境互作分析。
09
培养条件
(1)完全培养基配方:Leibovitz's L-15培养基(abs9469https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs9469&mk_channel=WXktzj)+10% FBS(SV30208.02https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30208.02&mk_channel=WXktzj)
(2)温度:37°C
(3)培养箱气体:100%空气,无CO₂
10
换液频率
2-3次/周
11
传代比例
1:2-1:4
12
冻存液配方
55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO(abs9187-100mLhttps://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs9187-100mL&mk_channel=WXktzj)或商品化细胞冻存液(130-129-552https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=130-129-552&mk_channel=WXktzj)
13
注意事项
(1)Leibovitz's L-15培养基不可以通入二氧化碳,会产生细胞毒性,导致细胞死亡。
(2)如实验室没有无CO₂培养箱,可使用DMEM培养基代替,在5% CO₂培养箱中培养。参考培养基配方:DMEM(SH30243.01https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SH30243.01&mk_channel=WXktzj)+10%FBS(SV30208.02https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30208.02&mk_channel=WXktzj)
(3)该细胞离心力低于常规细胞,需遵循低转速离心,高密度分种的原则。
ZR-75-1
01
名称
ZR-75-1(人乳腺导管癌细胞)
02
别称
ZR751;ZR75-1
03
简介
该细胞是从一名 63 岁罹患乳腺导管癌的女性患者乳腺组织中分离获得。该细胞产生高水平的 MUC-1 粘蛋白 mRNA,低水平的 MUC-2 mRNA,但不表达 MUC-3 基因。
04
种属
人
05
组织来源
乳腺导管;来自转移灶:腹腔积水
06
生长特性
贴壁生长
07
细胞形态
上皮样细胞
08
应用
乳腺癌发病机制、药物筛选及肿瘤生物学研究
09
培养条件
(1)完全培养基配方:RPMI-1640(SH30096.FShttps://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SH30096.FS&mk_channel=WXktzj)+10% FBS(SV30208.02https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=SV30208.02&mk_channel=WXktzj)
(2)温度:37°C
(3)CO2:5%CO2
10
换液频率
2-3次/周
11
传代比例
1:2-1:4
12
冻存液配方
95%完全培养基 +5%DMSO(abs9187-100mLhttps://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs9187-100mL&mk_channel=WXktzj)或商品化细胞冻存液(130-129-552https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=130-129-552&mk_channel=WXktzj)
13
注意事项
(1)ZR-75-1生长较缓慢,也可提高培养基中血清的浓度至15%。
(2)ZR-75-1消化至细胞呈小团块状即可分瓶·,该细胞贴壁能力较弱,可利用多聚-L-赖氨酸(abs42155907https://www.univ-bio.com/search.html?keyword=abs42155907&mk_channel=WXktzj)包被处理,增加培养表面吸附性。
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