《细胞探险队》旅程更新！继T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、NK细胞系（NK-92、NK-92MI、YT）的培养合集后，这次探索的是成纤维细胞系！紧跟《细胞探险队》，开启细胞培养的奇妙之旅：覆盖上百种细胞系，积累干货经验和技巧，让细胞培养不再难！各位童鞋，如果有想要了解的细胞系或者遇到哪些问题，也欢迎留言~
下期旅程：神经肿瘤细胞系培养合集（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）
3T3-L1
01名称
3T3-L1（小鼠胚胎成纤维细胞）
02别称
3T3-L1、Swiss 3T3-L1、3T3-L1 preadipocytes
03简介
3T3-L1细胞来源于Swiss albino小鼠胚胎成纤维细胞，是一种广泛用于脂肪细胞分化研究的模型细胞系。
04种属
小鼠
05组织来源
胚胎
06生长特性
贴壁细胞
07应用
脂肪细胞分化机制研究；代谢疾病如糖尿病/肥胖模型构建；药物筛选（如降糖药、减肥药）；脂质代谢及信号通路研究。
08细胞形态
成纤维细胞
图片来源于ATCC
图片来源于ATCC
09培养条件
（1）完全培养基配方：DMEM高糖（SH30243.01）＋10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C；
（3）气相：5%CO2
10换液频率
（1）未分化期：每2-3天换液一次，细胞密度较高时可缩短至48小时；
（2）分化期：诱导阶段需要每日换液。
11传代周期
当细胞密度到达80%-90%时，及时进行传代
12传代比例
1:3-1:5
13冻存液配方
90%完全培养基+10%DMSO（abs9187）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14注意事项
（1）3T3-L1分化能力下降可能与过度传代有关，建议使用低代次（P15以内）细胞，另外血清批次差异也会影响分化能力，建议使用新鲜血清或验证过的优质FBS，分化前需让细胞达到接触抑制，即融合2天后诱导；
（2）3T3-L1细胞贴壁不良，可能的原因是过渡消化及培养皿未包被，需要缩短胰酶的作用时间至2分钟内，使用胶原酶（0.1mg/mL）或明胶（0.2%）包被培养皿。
3T6-Swiss albino
01名称
3T6-Swiss albino（小鼠胚胎成纤维细胞）
02别称
3T6 Swiss Albino、Swiss 3T6、NIH 3T6、3T6
03简介
3T6-Swiss albino细胞是从分解的瑞士小鼠胚胎中分离并建立， 其能够分泌胶原质和透明质酸。
04种属
小鼠
05组织来源
胚胎
06生长特性
贴壁细胞
07应用
3D细胞培养
08细胞形态
成纤维细胞
图片来源于ATCC
09培养条件
（1）完全培养基配方：DMEM（SH30243.01）＋10%FBS（SV30208.02）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10换液频率
2-3次/周
11传代周期
2-3天
12传代比例
1:4-1:10
13冻存液配方
95%完全培养基+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14注意事项
（1）3T6-Swiss albino细胞贴壁较弱，避免过度消化。
NCTC clone 929
01名称
NCTC clone 929 [L cell, L-929] (小鼠成纤维细胞）
02别称
NCTC 929
03简介
NCTC 929细胞是由一只100日龄的雄性C3H/An小鼠乳晕的正常皮下疏松结缔组织和脂肪组织分离建立的。
04种属
小鼠
05组织来源
皮下结缔组织
06生长特性
贴壁细胞
07应用
病毒研究；抗肿瘤药物测试；细胞生物学研究；细胞毒性测试和免疫学研究。
08细胞形态
成纤维细胞
图片来源于ATCC
09培养条件
（1）完全培养基配方：90%MEM（SH30024.01）＋10% FBS（SV30208.02）＋1%双抗（SV30010）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10换液频率
2-3次/周
11传代周期
2-3天
12冻存液配方
55%基础培养基+40%FBS+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
13注意事项
（1）3T6-Swiss albino细胞贴壁较弱，避免过度消化。
（1）NCTC 929细胞形态展开较慢，贴壁48小时后形态展开较多；
（2）NCTC 929细胞对于血清非常敏感。当血清质量不佳时，细胞形态和生长状态可能发生变化，例如变为圆形，或增殖速度变慢，甚至停滞。
HFF-1
01名称
HFF-1（人皮肤成纤维细胞）
02别称
3T6 Swiss Albino、Swiss 3T6、NIH 3T6、3T6HFF1、HFF 1
03简介
HFF-1细胞是从新生男孩的包皮中分离并建立，可用来生产饲养层细胞。
04种属
人
05组织来源
包皮/皮肤
06生长特性
贴壁细胞
07应用
干细胞研究；组织修复；再生医学。
08细胞形态
成纤维细胞
图片来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库
09培养条件
（1）完全培养基配方：DMEM（SH30243.01）＋15%FBS（SV30208.02）
（2）温度：37°C
（3）CO2：5%CO2
10换液频率
2-3次/周
11传代周期
4-6天
12传代比例
1:5-1:7
13冻存液配方
83% RPMI-1640+7%FBS+10%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）
14注意事项
（1）HFF-1细胞低密度培养增殖较慢，推荐高密度接种以促进细胞增殖。
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