CAR-T 实体瘤治疗取得新成果

嵌合抗原受体（CAR）T细胞疗法是癌症免疫疗法的新兴领域，目前主要应用于血液瘤治疗，并在实体瘤治疗的临床研究方面取得了较大进展。CAR-T细胞经基因工程改造，表达能够识别和消除特定癌细胞的抗原特异性CAR[1]。CAR由胞内信号传导和跨膜（TM）结构域以及胞外单链可变区片段（scFvs）组成[2]。这些scFv是以铰链连接的轻链（VL）和重链（VH）可变区域，特异性识别和结合与肿瘤相关的抗原（TAA）[3]。作为化疗放疗后的新兴疗法，CAR-T细胞疗法已成为攻击癌症的重要治疗方法。在各种肿瘤中，尤其是血液系统肿瘤，CAR-T细胞疗法已取得显著的治疗效果，但其在实体肿瘤中的治疗效果有限[4]。CAR-T细胞的主要限制包括可用目标抗原有限、易受肿瘤微环境影响、肿瘤杀伤能力不足和存活时间短等[4]。在肿瘤微环境中，肿瘤可以通过多种免疫逃逸机制逃避免疫介导的识别，从而减弱免疫细胞的杀伤能力[5]。因此，如何减弱肿瘤微环境中抑制性免疫检查点的影响已成为包括CAR-T在内的肿瘤免疫治疗的迫切需求。

研究者首先设计并构建了靶向间皮素的anti-MLSN CAR-T细胞，该细胞携带了高效的第二代人源scFv，该scFv是从人源scFv噬菌体展示文库中筛选获得，特异性的靶向肿瘤细胞表面MSLN。如图1所示，anti-MSLN CAR-T细胞在体外具有抗肿瘤效果。

图1 构建抗-MSLN CAR-T细胞及其对肿瘤细胞的杀伤效应

（图源：Yang F, et al., Cancer Immunology, Immunotherapy, 2022）

由于TIGIT与CD155相互作用导致免疫细胞抗肿瘤作用降低，使得靶向TIGIT可以成为癌症免疫治疗的有效方法。研究者检测到来自健康受试者和卵巢癌患者的活化 T 淋巴细胞中的TIGIT表达。之后，通过使用抗α-TIGIT抗体增强抗 MSLN CAR-T细胞对肿瘤细胞的持续杀伤作用。这些结果表明，α-TIGIT抗体增强了MSLN CAR-T细胞对肿瘤细胞的持续杀伤效应。

图2 TIGIT抗体增强了MSLN CAR-T细胞的抗肿瘤效应

（图源：Yang F, et al., Frontiers in Immunology, 2023）

研究者进一步通过基因转染将TIGIT scFv引入CAR-T细胞中，构建了具有自分泌TIGIT的scFv的anti-MLSN CAR-T细胞，如图3所示。体内和体外实验研究证实，自分泌TIGIT 阻断型 scFv的CAR-T细胞在产生强大的抗肿瘤效果（图3和4）。

图3 TIGIT阻断scFv在体外增强了CAR-T细胞的抗肿瘤效应

（图源：Yang F, et al., Frontiers in Immunology, 2023）

图4 分泌阻断型TIGIT的CAR-T细胞在体内抑制肿瘤生长

（图源：Yang F, et al., Frontiers in Immunology, 2023）

文章结论与讨论，启发与展望

这项研究聚焦于CAR-T细胞在实体肿瘤免疫治疗中的瓶颈。该研究证明，TIGIT抗体和自分泌TIGIT阻断scFv都能够有效促进细胞因子的释放，增强anti-MSLN CAR-T细胞对肿瘤细胞的杀伤效果。体内实验证实自分泌TIGIT阻断型scFv增加了CAR-T细胞的浸润和活化，从而增强CAR-T对体内肿瘤的杀伤。表达免疫抑制蛋白scFv的CAR-T细胞可能为推进CAR-T和检查点阻断疗法在实体肿瘤中的应用提供了一种有前景的策略。