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发布日期:2025/9/21 20:40:00

光学显微镜的特性?分辨率的计算,您了解吗?

乡间小路 生物试剂从业者必读
 
2025年09月21日 06:26

显微镜是实验室中的主要机械装置,被用于从检查培养物的无菌到测定细胞内大分子的运动这样的一切事情。由于具有不同的用途和显微镜的种类,了解显微镜的一般特性,在适应新的显微镜和新实验时是有帮助的。另外,因为多数显微镜是公用的,保持这些交流技能的精练也是有帮助的。

通常认为显微镜的主要目的是对观察目标大小的显著放大作用,这一点毋庸置疑,但更为重要的是显微镜还提供了分辨力,两点间的最小距离可以被分辨。提供分辨和放大作用的是两种控制光操作--光镜和透镜,多数显微镜维持所有重要透镜的结构,然而不同质量的透镜能够改善相对放大的分辨率。分辨不依赖于放大,如下公式所示:

分辨率=0.61x光源波长/数字光圈

数字光圈(N.A.)是透镜聚光能力的描述,是光透过特别透镜传播角度和透过标本和前物镜之间传播媒介(折射率)的几何学计算。每一个物镜有一个数字光圈等级,数字愈高,透镜所能提供的分辨率愈高。

折射率(n)是衡量光被折射的一种测定,较高的折射率引起更多的光被透镜聚集,因此会有更好的照明和成像能力。油比空气折射率高(1.5vs.1.0),但只有在透镜数字光圈值大于1.0的情况下,使用油浸透镜才能增加数字光圈的光圈值。

影响总放大倍数的因素更为简单,总放大倍数是物镜放大倍数与目镜放大倍数的乘积。

为了看得到,通过显微镜成像必须与周围环境有一个高的对比度。对比度可以通过改变透过透镜的光的程度和角度来改变,也可以通过控制照射光源的强度或通过光圈和相环改变进入聚光镜的光来改变,还可以通过放在光源上面的滤光片过滤掉一些特别波长的光来改变。对比度也可以通过染色标本来增加。

 

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