银增强胶体金实验方案。传统胶体金侧流免疫分析的灵敏度通过银增强法可以提高一到两个数量级。这么重要的技术方法您掌握了吗？

讨论胶体金时不提及银增强法是不完整的。

Danscher和Holgatel首次描述了一个实用的方法,那就是利用自显影技术增强免疫胶体金组织切片的染色强度。使用乳酸根或醋酸根作为离子源，将对苯二酚溶解在低pH的柠檬酸缓冲液中用作还原剂。金属银作为外壳围绕在胶体金颗粒周围，增强了胶体金颗粒的可见度，染色过程中必须避免强烈的日光，达到所需的可见度后，使用定像液稳定结果。

下面为大家分享典型的银增强法的实验方案如下(改编自Hacker等)

(1)100mg乙酸银溶于50ml蒸馏水中，配置新鲜的乙酸银溶液(溶液1);

(2)23.5g柠檬酸三钠二水化合物和25.5g水柠檬酸溶于850ml蒸馏水中，配制柠檬酸盐缓冲溶液;

(3)250mg对苯二酚溶于50ml的柠檬酸盐缓冲溶液中,立即用柠檬酸调pH到3.8(溶液2);

(4)即将使用之前，等体积混合溶液1和溶液2，得到溶液3;

(5)用蒸馏水彻底清洗硝酸纤维素条;

(6)硝酸纤维素条浸入溶液3中2~5min;

(7)一旦达到所需的强化水平，通过将条带浸入已经准备好的1:10倍稀释的照相定影剂中(如Amphix、Ilfospeed或Agefix)，停止进一步染色;(8)条带用蒸馏水冲洗以除去化学物质。

据统计，传统胶体金侧流免疫分析的灵敏度通过银增强法可以提高一到两个数量级。

在他们的研究中，Horton和其同事用磷酸盐缓冲盐水和吐温-20清洗完成检测的试纸条，然后浸泡在银增强试剂中5min。然后灵敏度就从加强前的100ng/ml增强到加强后的100pg/ml。

目前使用侧流免疫分析检测抗原的灵敏度一般在较低的ng范围，使用银增强法后可以使其提高到10pg的检测范围。