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发布日期:2025/9/1 17:56:00

新品 | 快速免洗型生化检测分析Fcγ受体与抗体亲和力-文末有奖

生物试剂耗材商圈 2025年09月01日 16:26 北京

以下文章来源于Promega生命科学 ,作者Promega生命科学

Promega生命科学 .

Promega (Beijing) Biotech Co.,Ltd信息发布平台

 

 

 

高通量

免洗

FcγR-抗体

结合

检测

 

治疗性抗体候选分子筛选

Lot Release(批放行)

 

完成检测约1小时或更短

Lumit® FcγR Binding Immunoassays

单克隆抗体疗法已经彻底改变了广泛的癌症和自身免疫疾病治疗的格局。这些免疫调节分子通过多种机制发挥作用,其中最重要的一种机制是通过抗体与 Fc 受体的相互作用实现。

当抗体 Fc 结构域与免疫效应细胞 ( 如天然杀伤细胞和巨噬细胞 ) 上的 Fcγ 受体相互作用时,该效应功能被触发。多种因素都会影响 Fc 结构域和 Fcγ 受体的相互作用,对这些相互作用进行仔细的优化和监测对维持抗体药物的有效性和安全性十分必要。

Promega开发了一种易于使用的、可靠的、高通量的筛选方法,用来检测和比较 Fcγ 受体对 IgG Fc 结构域的亲和力。将在抗体开发、生产和加工过程中发挥重要的作用。

可检测的受体包括:

  • Lumit® FcγRI Binding Immunoassay

  • Lumit® FcγRIIA(H131) Binding Immunoassay

  • Lumit® FcγRIIA(R131) Binding Immunoassay

  • Lumit® FcγRIIIA(V158) Binding Immunoassay

  • Lumit® FcγRIIIA(F158) Binding Immunoassay

  • Lumit® FcγRllb Binding lmmunoassay

 

 

技术应用及优势

技术应用:

  • 分析抗体—Fc 受体相互作用

  • 确定单克隆抗体及其效应机制的血清半衰期

  • 高通量筛选 Fc 工程化抗体库

技术优势:

  • 无需洗涤或转移步骤,简单的添加-混合-读数

  • 均质型检测,简单快速 (1小时内获得结果)

  • 高灵敏度的生物发光读出结果

  • 生物发光检测提供了广泛的检测窗口

  • 检测只需要简单的化学发光检测仪

  • 检测兼容 384孔板模式

 

 

原理及实验流程

Lumit® FcγR Binding Immunoassays 是基于 NanoBiT® 蛋白互补技术的竞争性结合免疫检测。该检测方法使用 LgBiT 标记的人IgG1 作为示踪剂 (Tracer-LgBiT) ,以 C 末端生物素化的人 FcγR 结合链霉亲和素 -SmBiT 为靶点 (FcγR-Biotin-SA -SmBiT) 。在没有抗体分析物样品的情况下,Tracer-LgBiT 与 FcγR-SmBiT 靶点结合,产生最大的发光信号。而在分析物样品中,未标记的 IgG 将与 Tracer-LgBiT 竞争性的与 FcγR 靶标结合,导致浓度依赖性的发光信号下降。

简单的“加样 - 读数”流程

 

 

简单快速地测定 

Fc 受体结合亲和力

 

抗hCD20不同亚型与高亲和力FcγRI的差异性结合

(通过Lumit® FcγRI结合免疫检测法测定)。

图示为抗hCD20的IgG1、IgG2、IgG3和IgG4与FcγRI相互作用的典型结合曲线(以归一化发光值表示)。无分析物时(0nM抗体)产生的最大生物发光信号定义为100%,各抗体浓度下的信号值以相对于该最大值的百分比表示。采用四参数逻辑回归模型(1/y²加权)拟合数据以确定IC₅₀值。

 

检测抗体糖基化

对Fc结合的影响

 

Fc糖链去除对FcγRI结合能力的影响(采用Lumit®FcγRI结合免疫检测法测定)。图示为天然人源IgG与经PNGase F去糖基化IgG的典型结合曲线。去糖基化处理条件:37℃过夜(IgG浓度4mg/ml;PNGase F用量为每20mg IgG添加1ml)。无分析物时(0nM IgG)获得的最大生物发光信号设定为100%,各IgG浓度下的信号值以相对于该最大值的百分比表示。采用四参数逻辑回归方程(1/y²加权)拟合数据,计算表观IC₅₀值。

 

 

检测抗体效能

  • 使用 Lumit® FcγR (V158) Binding Immunoassay 检测曲妥珠单抗的相对效能, 获得了预期的 IC50 值变化; 

  • 使用所有的 Lumit® FcγR Binding immunoassays 对抗体效能进行类似的检测 ( 数据未显示 ); 

  • 针对 FcγR 的一组易于使用的效价试验可用于阐明抗体药物的生物活性。

 

订购信息

产品

规格

目录号

Lumit®FcγRI Binding Immunoassay

100 assays 

1000 assays

W7080

W7081

Lumit®FcγRIIa (H131) Binding Immunoassay

100 assays 

1000 assays

W7070

W7071

Lumit®FcγRIIa (R131) Binding Immunoassay

100 assays 

1000 assays

W7060

W7061

Lumit®FcγRIIIa (V158) Binding Immunoassay

100 assays 

1000 assays

W7050

W7051

Lumit®FcγRIIIa (F158) Binding Immunoassay

100 assays

1000 assays

W7040

W7041

Lumit®FcγRIIb Binding Immunoassay

100 assays

1000 assays

W7030

W7031

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规格

目录号

Lumit®FcRn Binding Immunoassay

100 assays 

1000 assays

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资料下载

研究FcγR-Ab相互作用的新型生物发光法

https://mmecoa.qpic.cn/sz_mmecoa_png/ja0lRam7q1u8BYwkloKBHoPwMKovpibCbboSazbSz0RwPReMtJwxMcpKWJnqiab4Xk4uOvcHibMA0XbGd3WY5LlXQ/640?wx_fmt=png&from=appmsg&tp=wxpic&wxfrom=5&wx_lazy=1

用于Fc 受体功能分析与表征的生物发光工具

https://mmecoa.qpic.cn/sz_mmecoa_png/ja0lRam7q1u8BYwkloKBHoPwMKovpibCbJdn5ze1KBHlR68hoNJ2GXicwrS6XHibUibtic5bRryibDXOR7nHKexyqW5A/640?wx_fmt=png&from=appmsg&tp=wxpic&wxfrom=5&wx_lazy=1

<点击上方图片下载相应技术资料>

 

竞答有奖

 

10个

无线跳绳

 

 

5个

露营灯

活动一:请在本次微信贴下方留言给出您的答案(回复序号即可,比如:1。回答正确的第1、10、20、30、40、50、60、70、80、90位小伙伴可获得无线跳绳1个。

 

活动二:请在本微信帖下方留言您使用过的Promega产品及产品优势,留言点赞数前5名将获得露营灯1个。

 

问题

针对Promega最新推出的Lumit® FcγR Binding Immunoassays 描述错误的是?

1. 流程简单,无需洗涤步骤

2. 可用于分析抗体与Fc 受体的结合亲和力

3. 兼容高通量,但只能用于96孔板检测

4. 现在可检测的Fcγ受体有FcγRI、FcγRIIa、FcγRIIIa和FcγRllb

 

留言截止时间:截止至2025年9月5日17:00;

本次活动仅限Promega生命科学终端用户参加;

本次活动解释权归普洛麦格(北京)生物技术有限公司所有,以上礼品可叠加获得哦~

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