18101298214
发布日期:2025/8/21 21:22:00

Aptamer与抗体的对比

 

核酸适配体具有与单克隆抗体相媲美的亲和力与特异性。与单抗相比核酸适配体还具有以下优点:可在体外筛选,靶分子范围广,分子量较低,没有免疫源性和毒性,可通过化学合成制备、改造与标记,化学稳定性好,能可逆变性与复性,可通过酶扩增、剪切等。这些优点使其在生物医学领域具有广阔的应用前景。

 

 标准

核酸适配体

抗体

基本组成

核酸(A,G,T,U和C)

氨基酸(20种)

物料

核酸(DNA或者RNA)

包含两条重链和轻链

分子量

6-66 kDa(20-220 nt)

150-180 kDa

大小

~4nm

~15nm

二级结构

发卡、假结、凸环和G-四联体

α-螺旋和β-折叠

结合形式/

作用机理

表面识别

三种分子间作用力包括范德华力,氢键和静电吸引,与抗体与抗原的结合力相似

结合域(锁和钥匙结构)

三种分子间作用力,抗体识别抗原表面的抗原决定簇

亲和力

适配体可以识别单位点改变和构象不同的目标物

抗原有多个表面决定簇,所以可能有多个抗体能进行识别

可能目标物

宽范围:离子,有机和无机小分子,核酸,多肽,蛋白,毒素,病毒颗粒,细胞,组织和活体动物

受限于能产生免疫原性的物质

毒素和一些小分子没有免疫原性。

产生和发现

体外SELEX实验(2-15轮)

2-8

可运用自动化SELEX进行筛选

生物体内实验

2-6个月

生产和消耗

固相化学合成

体外可以控制的程序

mg级别的在2天内完成,g级别的在2周内完成。

DNA容易合成,长的RNA需要特别修饰。

生产过程更容易达到GMP标准

体内(依赖动物产生)

容易受到细胞和动物源污染

合成5-20 g抗体需要三个月以上

来源于动物细胞:较贵

来源于转基因动植物:较便宜

批间差异性

没有或很低

显著

自然和加热情况稳定性

非常稳定有很长的保质期

高温下(即使在95℃)和程序性的变性和非变形处理也很稳定

核酸适配体能干粉化长期保存并在室温下运输

不稳定及有限的保质期

对温度敏感(即使是室温和37℃)

容易变性

需要冷冻保存和运输

化学修饰

易于进行和可控

糖环,骨架和碱基上均可进行修饰。

进行修饰不影响其亲和能力

受限及不可控

随机修饰容易导致序列无效及抗体失活

体内吸收

免疫原性

增加免疫反应,需要多次给药

抗核酸酶降解能力

容易降解

半衰期短(如果不修饰的话在10 min以内)

在体内对核酸酶有抗性,不受影响

肾脏过滤排泄情况

半衰期短(如果不与大分子交联的话半小时内会排除体外)

可以在体内留存很久(一个月)

 

核酸适配体的缺陷以及应对方案

核酸适配体在体内极易被核酸酶降解而表现出极大的不稳定性,因此需要对它进行修饰提供稳定性和抗降解能力。在核酸适配体的糖环上可以进行 2′-F, 2′-OCH3,2′-NH2修饰,在核酸骨架上可以进行硫代修饰,在核酸适配体的3’,末端可以进行inverted dT修饰。

 

 

Aptamer骨架修饰虽可以提高其在体内的稳定性,但在临床治疗方面还不能保证足够的药代动力学活性,因为aptamer分子量较小,静脉注射后几分钟内就可能通过肾脏排泄而被清除。要解决该问题可将它与某些具有生物相容性 大分子连接,延长其在体内的作用时间。

 

第一种核酸适配体药物哌加他尼钠是聚乙烯醇化的抗VEGF适体,由28个核糖核酸为主链配体,与2个相对分子质量为40kD的聚乙烯乙二醇支链共价相连。分子量为40 kD的PEG能防止核酸适配体快速被血浆清除。

 

上一篇:今天不讲技术,安利几个小工具,让您工作更加高效! 下一篇:核酸适配体专题——SELEX技术
已经到最底了
服务支持
新闻资讯
关于我们
微信扫一扫