《细胞探险队》旅程更新！继T（Jurkat、CTLL-2、MT-4、HuT-78）、B（Raji、Daudi、Ramos、DB）淋巴细胞系、单核-巨噬细胞系（Raw264.7、THP1、MH-S、J774A.1）、NK细胞系（NK-92、NK-92MI、YT）、成纤维细胞系（3T3-L1、3T6-Swiss albino、NCTC、HFF-1）、神经肿瘤细胞系培养合集（SH-SY5Y、SK-N-AS、BT325、SHG-44）、乳腺癌细胞系（MCF7、T-47D、MDA-MB-231、ZR-75-1）的培养合集后，这次探索的是肺癌细胞系！紧跟《细胞探险队》，开启细胞培养的奇妙之旅：覆盖上百种细胞系，积累干货经验和技巧，让细胞培养不再难！各位童鞋，如果有想要了解的细胞系或者遇到哪些问题，也欢迎留言~

下期旅程：肝癌细胞系培养合集（HepG2、SMMC-7721、Hep3B、J5）

A549（人肺腺癌细胞）

A 549;A549;NCI-A549;

人非小细胞肺癌细胞 A549 来源于 58 岁的白人男性肺癌组织，由 D.J. Giard 等人建立于 1972 年。其可以通过胞苷二磷酸胆碱途径合成高比例的不饱和脂肪酸卵磷脂。 

人

肺

贴壁细胞

上皮细胞样

常用于癌症、免疫肿瘤学、毒理学研究和高通量筛选。

图片来源于ATCC

（1）完全培养基配方：Ham's F-12K（abs9563）＋10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）

（2）温度：37°C；

（3）CO₂：5%CO₂

2-3次/周

3-4天

1:3-1:6

95%基础培养基+5%DMSO（abs9187）或商品化细胞冻存液（130-129-552）

（1）A549呈上皮细胞样，多角形，贴壁生长较快，推荐使用F-12K培养基。

（2）细胞培养需维持细胞密度在6×10³ ~ 6×10⁴ 细胞/cm²，勿超过7×10⁴/cm²。

NCI-H460 [H460]（人大细胞肺癌细胞）

NCI.H460;H460;H-460;

由 A.F. Gazdar 于 1982 年建立，来源于一位大细胞肺癌患者的胸腔积液。该细胞与正常肺组织 p53 mRNA 的表达水平相近，角蛋白（keratin）和波形蛋白（vimentin）表达阳性，神经丝三联体蛋白（neurofilament triplet protein）表达阴性。

人

肺；胸腔积液

贴壁细胞

上皮细胞样

主要用于大细胞肺癌的化疗药物筛选及肿瘤侵袭转移机制研究。

图片来源于：中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库

（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30096.FS）+10%FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）

（2）温度：37°C

（3）CO₂：5%CO₂

2次/周 

3-5天

1:3-1:8

95%完全培养基+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）

（1）H460细胞较难消化，建议使用T-75瓶加入2-3ml 0.25%胰酶-0.53mM EDTA进行消化。消化时避免摇动，静置5-15分钟，镜检确认细胞脱离；难消化时可利用37°C孵育辅助消化。

NCI-H146 [H146]（人小细胞肺癌细胞）

H146;H-146;NCIH146;

该细胞高表达四种生化标记物：神经元特异性烯醇酶(neuron specific enolase)、肌酸激酶的脑同工酶(brain isoenzyme of creatine kinase)、L-DOPA 脱羧酶(L-DOPA decarboxylase)和类蛙皮素免疫活性(bombesin-like immunoreactivity)。

人

肺；来源于转移灶：骨髓

悬浮细胞

聚团生长

常用于 3D 细胞培养及癌症免疫学的研究

图片来源于ATCC

（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30096.FS）+10%FBS（SV30208.02）

（2）温度：37°C

（3）CO₂：5%CO₂ 

2-3次/周

1:2-1:3

95%基础培养基+5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）

（1） H146细胞通常以大量聚团形式悬浮生长，无需消化，传代仅需稀释或离心。避免聚团过大（>500μm），影响营养吸收。

（2） 细胞培养过程中通常含有大量细胞碎片，属于正常现象，几乎无法完全去除，可在培养液中添加双抗，预防细菌污染。

NCI-H838[H838]（人非小细胞肺癌细胞）

H838;H-838;NCIH838

NCI-H838细胞于1984年建系，源于一位59岁患有非小细胞肺癌的白人男性吸烟者，从患者淋巴结转移灶分离而来。

人

肺；源自转移部位：淋巴结

贴壁生长

上皮样细胞

 常用于肺癌研究体外模型，探索疾病机制、测试抗癌药物疗效及研究肿瘤相关信号通路

图片来源：中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库

（1）完全培养基配方：RPMI-1640（SH30096.FS）＋10% FBS（SV30208.02）+1%双抗（SV30010）

（2）温度：37°C

（3）CO₂ ：5%

2-3次/周

1:3-1:6

95%完全培养基 +5%DMSO（abs9187-100mL）或商品化细胞冻存液（130-129-552）

（1） 该细胞消化前需用无钙镁DPBS 或 0.25%胰酶-EDTA 冲洗细胞层，有助于细胞消化；如有钙镁离子残留会抑制胰酶活性，导致消化不全。

（2） 该细胞消化过度可能会导致传代后贴壁率下降，酶解消化时间应控制在15min内，终止消化后应立即接种，减少悬浮暴露时间。

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中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库