一、实验原料及其用途

二、实验设备
离心机,滑膜仪、冷冻干燥机
三、实验步骤
1、新冠N抗体标记:取5ml 4/10000 的胶体金,加入一定量0.2M K2CO3(PH9.8-10.2),搅拌5min,加入新冠N标记抗体(所加抗体体积=50μg/抗体浓度),搅拌5min,再加入50ul封闭剂(5%BSA+5%Casein)终止标记;离心10000rpm,7min,去上清,沉淀用金子复溶液复溶,最后用金子复溶液定容到0.5ml(即1/10胶体金溶液体积);
2、配制金子工作液:用金子复溶液将新冠N标记抗体浓缩金最终稀释到10-12 0D配制成金子工作液;铺于玻璃纤维上;
3、制备干燥好的金子:将铺好的金子放入冻干机冻干(1-2h)或者放37度干燥房干燥过夜;
4、样品垫处理:将阻断剂使用10mMPB+2/万Tween-20或者购入样品垫处理液稀释至0.4mg/ml铺于玻璃纤维上,放入冻干机冻干(1-2h)或者放37℃干燥房干燥过夜。
5、新冠N抗体包被:将新冠N包被抗体使用包被稀释液稀释至1-1.5mg/ml包被;放50℃恒温箱4H或者37℃过夜。
6、制备金标条:用切条机将金标条按需要的宽度切条,组装后加样检测。
四、注意事项
1.标记胶体金的器皿需彻底清洗干净,标记大样时,玻璃器皿(带搅拌子)需装去离子水煮沸后,待冷却了再使用,以免标记过程中出现表面漂浮的油状物;
2.标记过程中,需要时刻注意胶体金溶液颜色的变化情况,若出现胶体金溶液发紫或严重聚沉现象,则无需进行后面的标记步骤,改变K2CO3或者抗体的量再重新进行标记。
