大家好，今天咱们来聊一个实验室里经常让人纠结的问题——加了防腐剂的样本，还能不能愉快地做ELISA？

相信不少小伙伴在收样本的时候，都遇到过这样的灵魂拷问：

“这管血加了EDTA/肝素/叠氮钠，还能测ELISA吗？”

“防腐剂会不会把抗原抗体反应搞崩了？”

“老板让我测的指标，样本偏偏加了防腐剂，我是不是要凉？”

别慌！今天我们就来扒一扒，防腐剂和ELISA之间的爱恨情仇。

 

 

防腐剂：是保护神，还是干扰怪？

 

 

首先，防腐剂在临床样本里的作用，主要是防止样本降解、抑制微生物生长，比如：

EDTA（乙二胺四乙酸）：常用于抗凝血，螯合钙离子，防止凝血。

肝素：另一种抗凝剂，抑制凝血酶活性。

叠氮钠（：强效抑菌剂，常用于长期保存抗体或样本。

硫柳汞：抑菌防腐，过去常用于疫苗或血清保存。

这些防腐剂虽然能保护样本，但它们也可能影响ELISA实验

比如：

改变蛋白构象（让抗原或抗体“变形”）

干扰酶活性（比如HRP辣根过氧化物酶，叠氮钠就是它的“死对头”）

非特异性结合（让抗体乱跑，导致假阳性/假阴性）

所以，关键问题来了：加了防腐剂的样本，到底能不能用？

 

 

 

 

 

不同防腐剂对ELISA的影响

 

 

（1）抗凝剂：EDTA vs. 肝素

EDTA：一般不影响大多数ELISA，但某些依赖钙离子的检测（比如某些凝血因子、补体系统）可能会受影响。

肝素：比EDTA更温和，但高浓度可能干扰某些基于电荷的免疫反应。

结论：如果是常规ELISA（比如测细胞因子、激素），EDTA或肝素抗凝的血浆/血清通常没问题，但最好查查试剂盒说明书，看看厂家有没有特别说明。

 

（2）叠氮钠（NaN₃）：HRP酶的“天敌”

叠氮钠是辣根过氧化物酶（HRP）的强抑制剂，如果你的ELISA用的是HRP显色系统，那加了叠氮钠的样本可能会让信号直接扑街！

如果样本含叠氮钠，可以透析或稀释

换用碱性磷酸酶（AP）系统的ELISA试剂盒

 

（3）硫柳汞：逐渐被淘汰，但仍有风险

硫柳汞含汞，可能影响某些蛋白的稳定性，现在很多试剂盒已明确建议避免使用。如果样本里有它，最好换用新鲜样本或确认试剂盒兼容性。

 

 

 

 

 

实战建议：如何判断样本能不能用？

 

 

（1）先看试剂盒说明书

靠谱的ELISA试剂盒都会在说明书里写明样本类型要求

比如：

“适用于血清、血浆（EDTA/肝素抗凝）。”

“避免使用含叠氮钠的样本。”

如果说明书没写？ 直接联系厂家技术支持，别自己瞎试！

 

（2）做预实验验证

如果样本很珍贵，又不知道防腐剂会不会干扰

 

 

可以：

对比实验：用相同样本（加防腐剂 vs. 不加）平行检测，看结果是否一致。

稀释样本：降低防腐剂浓度，减少干扰。

（3）实在不行，换方法！

如果防腐剂干扰太大，可以考虑：换检测技术，纯化样本

记住：

✅ 先查说明书！

✅ 不确定就做对比实验！

✅ 别让防腐剂毁了你的数据！

 

科研路上，样本处理是门玄学，防腐剂可能是你的朋友，也可能是隐藏的坑。但只要掌握规律，提前规划，就能少走弯路！

 

 

 

说到ELISA检测，如果你的实验经常遇到样本兼容性问题，不妨试试

 

 

睿信生物ELISA试剂盒

✔ 抗干扰性强：优化缓冲体系，减少防腐剂影响

✔ 高灵敏度：低丰度指标也能精准检出

✔ 多种样本兼容：血清、血浆、细胞上清等广泛适用

✔ 严格质控：批间差小，数据稳定可靠

你的样本加过防腐剂吗？ 欢迎在评论区分享你的血泪史or成功经验！