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发布日期:2025/8/13 20:43:00

新品 | HiBiT活细胞靶向蛋白降解高效新利器!LgBiT mRNA递送系统

 

 

新品发布

NEW

ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System

 

HiBiT 标签仅11个氨基酸,非常适合在活细胞水平进行内源性蛋白表达检测,如活细胞水平检测 靶向蛋白降解(TPD)。在将HiBiT标签与目标蛋白融合后(例如通过 CRISPR 介导的基因编辑),需同时表达 LgBiT 蛋白,LgBiT 蛋白以高亲和力与 HiBiT 结合,构成 NanoBiT® 萤光素酶。相比传统的质粒转染,Promega 发布了新的mRNA递送系统:

ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System 能够更均匀、高效地转染 LgBiT mRNA,更方便快捷地从单个孔中的活细胞中动态地量化HiBiT 标记的蛋白质。

ViaScript™ mRNA Transfection Reagent 是一种新型的非脂质体制剂,旨在以最小的毒性将 mRNA 高效转染到多种细胞系中,为转染细胞中的蛋白表达水平提供了更多的控制,递送系统中已包含mRNA转染试剂和 LgBiT mRNA。

 

 

HiBiT活细胞动力学检测的优势:

  • 方便观察单时间点检测可能遗漏的效应(如钩状效应);

  • 通过连续取样可准确测定关键化合物特性(如蛋白降解/恢复速率),推动治疗药物的发现、筛选和优化;

  • 通过同一孔板的连续取样提升实验重复性;

  • 无需为每个时间点单独设置孔板,节省时间与试剂。

 

ViaScript™ LgBiT mRNA 递送系统的【核心优势】:

  • 能够在细胞群体中均匀且可调节的表达;

  • 提高转染效率且不影响细胞活性;

  • 可快速地产生稳定的信号(4小时即可产生信号,信号可稳定48小时以上)。

 

 

Steps

 

 

检测步骤

 

ViaScript™ LgBiT mRNA 递送系统提供更快且更均匀的 LgBiT 表达,以获得更具代表性和精确的活细胞动力学 HiBiT 检测结果。

 

 

 

 

01

实现均匀表达以获得一致和可靠的结果

上图. 一个22Rv1 AR-HiBiT克隆细胞系被用ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统(左)或LgBiT表达载体(右)转染过夜。细胞被用1µM ARV-110 PROTAC(底部)处理6小时以诱导AR的降解,或者用溶剂对照(顶部)处理相同时间。在添加Nano-Glo®活细胞底物后使用GloMax® Galaxy细胞成像仪收集图像。

 

02

观察终点法检测模式可能错过的效应

上图.ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统增强了对HiBiT CRISPR敲入细胞系中活细胞蛋白质水平的定量分析,提供了超越终点测定法的对模型和化合物更深入的理解。如上所述,动力学HiBiT靶向蛋白质降解测定法允许精确测量蛋白质降解速率、识别钩状效应(中间面板箭头所示)以及表征蛋白质恢复情况。

 

03

更快的获得结果

上图. 使用ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统进行转染后,HiBiT信号比DNA质粒转染后更早达到峰值,使您能够更早开始实验并更快获取数据。

 

04

对细胞毒性更小

上图. ViaScript™ LgBiT mRNA递送系统提供高转染效率且细胞毒性极小,在各种细胞系中的表现优于DNA转染。通过将mRNA转染与HiBiT CRISPR敲入细胞系相结合,您可以在更精确模拟患者生物学的细胞环境中工作,从而获得更具代表性的结果,并推动研究的成功。

 

 

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产品

规格

目录号

ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System

10 plates

NE1130

5x10 plates

NE1140

ViaScript™ LgBiT mRNA Delivery System plus eGFP

10 plates

NE1120

ViaScript™ mRNA Transfection Reagent

10 plates

EV4961

5x10 plates

EV4965

ViaScript™ mRNA Transfection Reagent plus eGFP    

10 plates

NE1100

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