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发布日期:2025/8/12 21:10:00
Seebio可提供一系列抗体/蛋白理化分析工具酶于协助单克隆抗体、融合蛋白药物、生物类似药等生物药的表征分析及其相关翻译后修饰,助力生物药物的开发和质量控制。
 
 
 
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背景分析

 
用作生物药物的治疗性抗体结构复杂,异质性高,在制造过程中需要严格监管和控制。抗体分子大小异质性是抗体的生产工艺优化、生产过程控制及放行分析中重要质控指标之一。为了确保单克隆抗体及其他生物分子药物的安全性和有效性,需要对这些药物进行全面深入的表征分析。
随着获批的抗体药物数量逐年急剧增加,例如mAb、Fc融合蛋白、Fab、ADC、双特异性抗体和双特异性T细胞接合剂(BiTE),了解单个翻译后修饰(PTM)可以更好地分析和预测治疗性抗体的体内功效、药代动力学和作用机制。
治疗性抗体、融合蛋白等的表征通常从三个水平进行,包括自上而下的完整分子量水平、自下而上的多肽水平、亚基水平。常用作治疗性蛋白理化分析的工具酶有PNGase F酶、IdeS酶、Papain、GinsKHAN、GlySERIAS酶、肽图分析用的胰蛋白酶Trypsin、GluC、LysC、糜蛋白酶Chymotrypsin等。
Seebio可提供一系列抗体/蛋白理化分析工具酶,用于协助单克隆抗体、融合蛋白药物、生物类似药等生物药的表征分析及其相关翻译后修饰,助力生物药物的开发和质量控制。
 
01

蛋白测序肽图分析工具酶

 
 
 

蛋白酶

酶切位点

特点

重组胰蛋白酶(质谱级)

赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端

胰蛋白酶β型占比>80%;

比活6200 USP U/mg(相当于18600 BAEE U/mg)

强稳定性,冻融次数可达10次;

和进口品牌比,肽段漏切率更低、蛋白鉴定数更高;

批间差稳定,可提供相关法规支持文件。

重组赖氨酰内切酶 (Lys-C)

赖氨酸羧基侧的酰胺、酯和肽键

可单独使用,也可与胰蛋白酶联用,鉴定更多的蛋白数以及磷酸化位点数目;

在4M尿素或者0.1%SDS存在的情况下仍可保持较高的酶活性。

Glu-C蛋白酶

谷氨酸或天冬氨酸残基羧基端肽键

对于分析赖氨酸和精氨酸含量高的蛋白质,与胰蛋白酶联用可显著提高鉴定蛋白数目;

适用于分离和富集磷酸化肽段;

重组人α-糜蛋白酶

酪氨酸,色氨酸和苯丙氨酸的羧基端肽键

特别适用于膜蛋白分析。

重组金属蛋白酶Asp-N

天冬氨酸残基 (Asp) 和谷氨酸残基 (Glu) N 末端的肽键

当 pH 范围在 4.0-9.0 时,Asp-N 的活性最佳。该测序级蛋白酶可以单独使用,也可以与其它蛋白酶一起使用,以产生蛋白消化物,然后通过肽指纹图谱或 MS/MS 光谱匹配用于肽图谱或蛋白鉴定。该测序级蛋白酶适合于溶液或凝胶中的消化反应。

 

02

糖基化分析工具酶

糖苷酶

名称

酶切位点

特点

唾液酸修饰

唾液酸酶(a2-3,6,8)

糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8键连接的唾液酸

可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸。

唾液酸酶(a2-3,6,8,9)

糖蛋白和寡聚糖上通过a2-3,a2-6,a2-8和a2-9键连接的唾液酸

可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸;

可以忍受0.5%-1.0%的去污剂。

N-糖基化修饰

PNGase F

天冬酰胺和最内侧的GIcNAc之间的糖苷键

适用于抗体和糖蛋白的N-糖基完全去除;

可在变性与非变性条件下切割糖蛋白。

重组Endo H

N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构

适用于抗体或者其它糖蛋白的N-连接高甘露糖的完全去除。

存储液中不含甘油。

O-糖基化修饰

O糖蛋白酶

粘蛋白型O-连接糖(无论是否唾液酸化)的丝氨酸或苏氨酸残基

适用于O-糖基化分析;

无需唾液酸酶预先处理。

 

03

抗体切割酶

IdeS Protease和IdeZ Protease是分别来源于化脓性链球菌 (Streptococcus pyogenes)和马链球菌兽瘟亚种 (Streptococcus equi)的重组蛋白酶,该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别人等特定物种和特定类型的IgG,并在抗体铰链区下方的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab')2片段和Fc片段。IdeS/Z酶作为工具酶应用于抗体类药物的制备和结构表征分析,是用于表征治疗性抗体、单克隆抗体、抗体偶联药物、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具

名称

酶切位点

特点

IdeS蛋白酶

特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点

可将lgG水解为完整的F(ab')2片段和Fc片段。

IdeZ蛋白酶

特异识别IgG,并在IgG下铰链区的特定位点

可同时作用于N-羟乙酰神经氨酸和N-乙酰神经氨酸;

可以忍受0.5%-1.0%的去污剂。

 

04

标签切除工具酶

名称

酶切位点

特点

重组TEV蛋白酶(rTEV Protease)

严格识别七氨基酸序列EXXYXQ(G/S)切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。

一种用来切除融合蛋白上标签序列的常用工具酶,较EK、SUMO等蛋白酶的位点专一性更强,具有高活性和高特异性的特点。

 

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Seebio蛋白工具酶汇总

 

蛋白测序肽图分析

货号

产品名称

规格

DCE0060U

重组胰蛋白酶(质谱级,液体)

25ug

100ug

DCE0060T

重组胰蛋白酶(质谱级,冻干)

25ug

100ug

EXK0369B

重组赖氨酰内切酶

20ug

AXJ4266C

重组Glu-C蛋白酶,冻干

25ug

100ug

EXJ4266E

Recombination Endoproteinase Glu-C(V8 Protease),lyophilizate

1mg

10mg

ECE0162A

重组金属蛋白酶Asp-N

5ug

10ug

20ug

AXJ4266B

重组Glu-C蛋白酶

20ug

100ug

DCL0640B

重组人α-糜蛋白酶(冻干)

20ug

50ug

100ug

糖基化酶

ECE0441E

PNGase F重组糖苷酶

20KU

40KU

DCE0447C

重组Endo H

3KU

15KU

DCE1244A

EndoS(糖苷内切酶 S) 重组

6KU

30KU

DCE0448B

O糖蛋白酶

20U

100U

DCE0448C

O-糖苷酶

2000KU

10000KU

DCE0457F

唾液酸酶(α2-3,6,8)

500U

2KU

10KU

DCE0457E

唾液酸酶(α2-3,6,8,9)

2KU

10KU

抗体切割酶

ECE0711A

IdeS蛋白酶

700U

ECE0712A

IdeZ蛋白酶

1KU

2KU

标签切除工具酶

EBY3644A

Seebio®重组烟草蚀纹病毒蛋白酶(rTEV Protease)

1KU

5KU

10KU

 

 
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相关产品

 

货号

产品名称

规格

ACH0011F

盐酸胍

1kg

DCH0005D

二硫苏糖醇(DTT)

5g,100g,250g,500g

AAU0091A

碘乙酸

1g,5g

ACC0030

三羟甲基氨基甲烷<结晶>(Tris base)

100g,500g,1kg,25kg

ACC0029

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(TRIS-HCl)

250g,500g,1kg,25kg

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