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发布日期:2024/1/31 14:03:00

SurePrint文库制备工艺

● 基于SurePrint技术,使用ATCG四种碱基作为“墨水”

● 碱基均匀地沉积在特殊制备的芯片上

● 在整个芯片上,寡核苷酸以一次一个碱基的方式堆积, 直到达到所需的长度

● 将合成好的序列从芯片上切割下来,混合、冻干后以单管形式提供

● Oligo文库可通过重悬、扩增,被应用于任何下游实验应用

图1. 安捷伦喷墨打印技术工作流程

 

文库质量

寡核苷酸文库的选择和设计,有多个参数需要考虑,其中最重要的两点:

1)保真度:直接涉及文库错误率(多少碱基出现1个错误):

图2. 通过MiSeq测序验证保真度,平均错误率1/2265

 

2)序列均一度:安捷伦DNA合成技术通过合理的算法保证所有序列分布均一,即使是合成序列非常复杂的文库

图3. MiSeq测序分析验证序列均一度

 

文库优势

● 一致、高复杂性、平行合成

● 行业领先的保真度和均一性

● 可为几乎任何应用或实验方法提供定制设计

● 最多可合成244,000 寡核苷酸

● 支持30-230 nt的寡核苷酸长度

 

百变应用

● CRISPR文库筛选:靶点发现、功能基因组研究

图 4. 安捷伦的大规模并行寡核苷酸合成平台是获得 CRISPR 文库的基础。此外,还提供多种多样的仪器和试剂帮助您获得理想的 CRISPR 筛选结果

 

● 蛋白质设计:一种了解蛋白质工作原理的创新方法

美国华盛顿大学David Baker团队使用SurePrint 230bp oligo文库设计针对目标蛋白的迷你粘合剂(minibinder)肽序列,用来高通量筛选最合适的序列。Dr. Coventry认为安捷伦是帮助科研工作者通往真实世界的大门,在安捷伦提供寡核苷酸文库之前,他所做的工作都是停留在电脑端、不真实的。在使用安捷伦寡核苷酸文库后,团队先后设计和表达了数百万种蛋白质。

图5. 数以百万计的蛋白质实验表征和优化步骤[1]

 

● 突变发生

● 酶工程

● 基因组装

● 疾病治疗和测试

● 大规模平行报告分析(MPRA) 

● 合成生物学、生物传感器

● DNA数字存储

● 传染病研究

● ………… 

更多精彩应用,期待您的探索发现~

 

Reference:

[1] Cao, L., Coventry, B., Goreshnik, I. et al. Design of protein-binding proteins from the target structure alone. Nature 605, 551–560 (2022). https://doi.org/10.1038/s41586-022-04654-9

 

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