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发布日期:2023/8/2 15:55:00

以高准确度和精度重复进行挥发性、粘性、起泡和油性液体移液相当具有挑战性。由于这些液体的固有特性,它们可能会粘在塑料上或滴漏。这些挑战只需遵循良好移液实践和考虑液体的具体特性即可克服。

 

在本实用指南中,我们提供了一些建议,帮助您选择配有兼容移液器吸头的合适移液器,以及针对困难液体的正确移液技术。

 

应该选择哪种移液器?

为获得尽量准确和可重复性结果,请选择标称容量(最大容量)最接近移液量的移液器。图1显示了使用赛多利斯Picus® 50-1,000μL 移液器和5 - 120μL 移液器进行的两组100μL 乙醇移液操作。对于Picus® 5 - 120μL 移液器,当操作者、移液模式(反向移液)和移液技术(预润洗循环次数)保持不变时,可获得更好的准确度和再现性。

图1.在最大容量时,移液的准确度和再现性最好

在反向移液中,吸液量超过目标体积。将柱塞压到第一个停止位置后,排出总目标体积,多余的量会留在吸头中。多余的量可返回吸头中继续使用,也可通过将柱塞压到第二个停止位置来废弃吸头中的多余液体。在某些情况下,存在余量对移液性能有明显好处,例如移液挥发性或粘性液体时。

 

应该用哪种移液技术?

正向移液和反向移液是手动移液器可使用的两种基本移液模式。基本的良好操作包括将液体吸入吸头时保持移液器直立(0° 角)状态,将液体排液到目标容器时将移液器稍微倾斜(30-45° 角)。

图3A显示了移取1,000μL水时的吸液角度对准确度的影响。随着吸液角度的增加,实际移液量几乎呈直线增加。图3B显示了使用反向移液技术排液时,将移液器保持在0°角而非45°角对准确度和精度的负面影响。反向移液1,000μL 水时,将移液器保持在45°角可获得更精准的结果。

 

图3.吸液和分液角度对准确度和精度的影响

 

如何应对液体从移液器吸头滴落?

如果液体从移液器吸头滴落,应首先确保吸头正确密封在移液器的吸头圆锥上。图4显示了使用不同制造商的移液器吸头时的移液性能差异。

图4.吸头和移液器:兼容性很重要

注:不同移液器吸头与Tacta® 10 μL 移液器结合用于测量10 μL。每个数据点代表用同一移液器吸头进行的10 次测量。每种颜色对应一个移液器吸头品牌,其中“A” 为赛多利斯移液器吸头,“B-E” 为其他制造商吸头。一个品牌内的数据点之间的分布显示了同一吸头盒内的各吸头间的差异。

如果在转移挥发性液体以外的其他液体时有大量泄漏的情况,请检查移液器吸头圆锥是否干净;使用无纺布和合适的清洁剂(如乙醇)将其擦拭干净。检查吸头圆锥或活塞和套筒之间的密封件有无损坏。

挥发性液体

 

移取挥发性液体和溶剂(如乙醇、丙酮或乙腈)时,从移液器吸头滴落是常见现象。为避免滴落,请预润洗吸头,反向移液更有助于改善滴漏情况。

图5A显示了在处理乙腈时,无预润洗的正向移液和适当预润洗的反向移液之间的差异。同样的建议适用于任何容量,如图5B 所示。

 

图5.移取挥发性液体

粘性液体

 

缓慢的吸液和排液速度至关重要,因此实现粘性液体的可靠移液其实只需适当的技术和耐心。反向移液可提高准确度。还需注意的是,请勿将吸头浸入液体太深。此外,吸液时,移液器吸头应在液体中多浸几秒钟,因为这样将使液体足以全部吸入到吸头中。排液时,建议将吸头抵住目标容器壁,使液体附着在目标容器上。宽口吸头也可用于促进液体流动,尤其是在溶液中有颗粒的情况下。

图6显示了采用反向移液和Optifit 宽口吸头移取1,000μL甘油与采用正向移液和标准Optifit 吸头移取1,000μL 甘油的差异。

Picus® Nxt 移液器在用户认为有帮助的情况下,可通过正向移液进行重复吹出。

图6. 移取粘性液体

油类

 

与正向移液相比,反向移液油的排液更准确,再现性更好。

在图7中,使用赛多利斯Tacta® 10-100μL 手动移液器移取丁香酚。

图7. 油类移液

泡沫液体

 

含清洁剂或蛋白质的液体容易起泡。处理这些液体时,必须缓慢移液并使用反向移液技术。

 

移液器应多久维护一次?

经常清洁移液器是一种良好操作。每天擦拭外部和吸头圆锥可减少交叉污染机率,并确保正确吸头密封。清洁移液器下端内部可去除积聚的灰尘,这有助于活塞密封并保持较低的操作力。清洁还有助于发现移液器是否因溶剂或蒸汽而老化,以免影响结果。

请记住,无论何时拆装下端,最好在分析天平上检查移液器性能,确认组装正确,无任何东西阻碍活塞的完全密封。

建议移液器的最长维护间隔时间为一年。但应根据移液频率、已移液的液体以及移液器的使用年限和型号等因素来调整间隔时间。校准应至少每年进行一次,或根据使用频率每3 - 6 个月进行一次。更换移液器零件(如吸头圆锥或活塞)后,还应进行校准;现场高压灭菌后,只需进行性能检查。

 

总结

移液技术在获得理想结果方面具有核心作用。移取具有挑战性液体时,学会利用反向移液非常有用。良好实践是始终首先考虑液体,并相应采取移液操作。

表1总结了各种液体的建议移液技术。

 
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